本文選題：花生 + AhPLDα基因　； 參考：《華北農(nóng)學(xué)報》2016年06期

【摘要】：為了明確花生AhPLDα基因在響應(yīng)干旱脅迫信號傳導(dǎo)中的功能和作用機制,以ABA處理的冀花4號花生葉片c DNA為模板,用RT-PCR方法擴增AhPLDα1和AhPLDα2的全長CDS片段,采用酶切-連接的方法分別將這2個基因定向克隆到植物表達(dá)載體p Bar-F3上,凍融法將重組子轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌GV3101,利用改良Floral-dip法將過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入擬南芥。菌落PCR和酶切結(jié)果表明,Ca MV35S啟動子驅(qū)動的過表達(dá)載體重組質(zhì)粒p Bar-AhPLDα構(gòu)建正確。通過RT-PCR和qRT-PCR驗證,表明AhPLDα1和AhPLDα2基因整合到擬南芥基因組中并能過量表達(dá),獲得了陽性轉(zhuǎn)基因純合株系。干旱脅迫試驗表明,轉(zhuǎn)基因植株的耐旱性較野生型明顯增強�？梢�,AhPLDα基因參與了干旱脅迫應(yīng)答過程,是轉(zhuǎn)基因途徑提高作物耐旱性的潛在候選基因。
[Abstract]:In order to clarify the function and mechanism of peanut AhPLD alpha gene in response to drought stress signal transduction, the whole long CDS fragment of AhPLD alpha 1 and AhPLD alpha 2 was amplified by RT-PCR method with C DNA of peanut leaf No. 4, which was treated by ABA, and the 2 genes were cloned to the plant expression vector p Bar-F3 respectively by the method of enzyme cut connection. The recombinant plasmid was transferred into Agrobacterium tumefaciens GV3101 by freezing and thawing method. The overexpressed plasmid was transferred into Arabidopsis by modified Floral-dip method. The result of colony PCR and enzyme digestion showed that the recombinant plasmid P Bar-AhPLD a, which was driven by Ca MV35S promoter, was constructed correctly. It was verified by RT-PCR and qRT-PCR that AhPLD alpha 1 and AhPLD alpha 2 gene were integrated into Arabidopsis thaliana. The test of drought stress showed that the drought resistance of the transgenic plants was obviously stronger than that of the wild type. The AhPLD a gene was involved in the response process of drought stress, and it was a potential candidate gene for improving the drought tolerance of the crops.
【作者單位】： 河北省農(nóng)林科學(xué)院糧油作物研究所河北省作物遺傳育種實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31201239;31301354) 河北省重點基礎(chǔ)研究項目(10960122D) 河北省博士基金項目(F14E055610) 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(CARS-14)
【分類號】：S565.2;Q943.2

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本文編號：2081567