縫隙連接蛋白26基因修飾對人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響
本文選題:縫隙連接蛋白 + 肝癌細(xì)胞 ; 參考:《中國老年學(xué)雜志》2017年02期
【摘要】:目的探討縫隙連接蛋白(Cx)26基因?qū)θ烁咿D(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞株(HCCLM3)細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響。方法采用慢病毒載體(LV)轉(zhuǎn)染法將載體LV-Cx26轉(zhuǎn)染高轉(zhuǎn)移性HCCLM3細(xì)胞為研究組,僅轉(zhuǎn)染空載體LV-NC-Cx26為對照組,未轉(zhuǎn)染的HCCLM3細(xì)胞為空白組。RTPCR和Western印跡測定轉(zhuǎn)染后Cx26 mRNA和蛋白表達(dá);劃痕荷載染料傳輸實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞通訊功能;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期并通過CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)、Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖、侵襲能力。結(jié)果研究組Cx26 mRNA和蛋白表達(dá)量均明顯高于對照組和空白組(P0.05)。研究組轉(zhuǎn)染慢病毒載體LV-Cx26后的細(xì)胞通訊功能明顯強(qiáng)于對照組、空白組,即劃痕細(xì)胞中的熒光染料可傳遞到相鄰的3~4列細(xì)胞。研究組G0/G1期細(xì)胞數(shù)明顯多于對照組和空白組,S期細(xì)胞數(shù)明顯少于對照組和空白組(P0.05)。M期三組細(xì)胞數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。CCK-8法檢測顯示,72 h起研究組細(xì)胞增殖速度明顯低于同期對照組和空白組(P0.05);對照組和空白組各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞增殖情況無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)顯示,研究組穿膜細(xì)胞數(shù)明顯少于對照組和空白組(P0.05)。結(jié)論轉(zhuǎn)染Cx26基因可有效抑制HCCLM3細(xì)胞的增殖和侵襲能力,降低惡性生物學(xué)特征,可成為晚期肝癌治療的新思路。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of gap junction protein (CX) 26 gene on proliferation and invasion of human hepatocellular carcinoma cell line (HCCLM3). Methods LV-Cx26 was transfected into high metastatic HCCLM3 cells by using lentivirus vector (LV) transfection method, only the empty vector LV-NC-Cx26 was used as control group. The untransfected HCCLM3 cells were treated with blank group. RT-PCR and Western blot were used to detect the expression of Cx26 mRNA and protein. The cell cycle was detected by flow cytometry and the cell proliferation and invasiveness were detected by Transwell cell invasion assay with CCK-8 proliferation assay. Results the expression of Cx26 mRNA and protein in study group was significantly higher than that in control group and blank group (P0.05). The cell communication function of lentivirus vector LV-Cx26 was stronger than that of control group. The fluorescent dye from scratch cells in blank group could be transferred to the adjacent 3Cx26 cells. The number of cells in the G _ 0 / G _ 1 phase in the study group was significantly higher than that in the control group and the blank group. The number of cells in the S phase of the study group was significantly lower than that in the control group and the blank group (P0.05) .There was no statistical difference among the three groups (P0.05). At the same time, the control group and the blank group (P0.05); the control group and the blank group at each time point cell proliferation no statistical difference (P0.05) .Transwell cell invasion test showed, The number of perforating cells in the study group was significantly less than that in the control group and the blank group (P0.05). Conclusion transfection of Cx26 gene can effectively inhibit the proliferation and invasion of HCCLM3 cells, reduce the malignant biological characteristics, and become a new approach for the treatment of advanced liver cancer.
【作者單位】: 暨南大學(xué)附屬第一臨床學(xué)院華僑醫(yī)院胃腸外科;
【基金】:廣東省科學(xué)技術(shù)廳計(jì)劃項(xiàng)目(No.2016ZC0142)
【分類號】:R735.7
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,本文編號:2077157
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