發(fā)布時間：2018-06-28 04:14

  本文選題：可誘導(dǎo)剔除 + 選擇標(biāo)記基因NPTⅡ　； 參考：《核農(nóng)學(xué)報》2017年10期

【摘要】：為了剔除冗余且有潛在安全問題的選擇標(biāo)記基因,本研究通過PCR擴(kuò)增出ubiquitin啟動子序列、lox P序列、Cre-GR融合基因和NPTⅡ抗性基因的編碼區(qū)序列,采用酶切連接的方法將其引入載體p BRACT806,從而構(gòu)建一個新的可誘導(dǎo)剔除選擇標(biāo)記基因及重組酶基因的表達(dá)載體p BLCK,測序結(jié)果顯示其構(gòu)建成功。該載體含有Gateway組件,可進(jìn)行外源目標(biāo)基因的高效重組整合;具有NPTⅡ基因,利于轉(zhuǎn)基因植株的篩選;具有可誘導(dǎo)剔除外源基因的Cre-GR組件,誘導(dǎo)處于lox P位點之間的抗性標(biāo)記基因NPTⅡ和Cre-GR融合基因的剔除,保留目標(biāo)基因表達(dá)元件。此外,目標(biāo)基因、Cre-GR融合基因和NPTⅡ基因都由ubiquitin強(qiáng)啟動子控制,可在農(nóng)作物中組成型超量表達(dá)外源基因。本研究為農(nóng)作物轉(zhuǎn)基因安全性研究提供了新的載體系統(tǒng),具有一定的育種價值。
[Abstract]:In order to eliminate the redundant and potentially safe selection marker genes, this study amplified the sequence of ubiquitin promoter sequence, LOX P sequence, Cre-GR fusion gene and NPT II resistant gene by PCR, and introduced it into the carrier P BRACT806 by enzyme cut connection, and constructed a new inducible knockout marker gene. P BLCK, the expression vector of recombinant enzyme gene, is successfully constructed. The vector contains Gateway components, which can carry out the efficient recombination of foreign target genes, have the NPT II gene, be beneficial to the screening of transgenic plants, and have the Cre-GR components that can induce the elimination of exogenous genes and induce the resistance marker between the LOX P loci. In addition, the target gene, the Cre-GR fusion gene and the NPT II gene are all controlled by the strong promoter of the ubiquitin, and the target gene, the Cre-GR fusion gene and the NPT II gene are controlled by the ubiquitin strong promoter. This study provides a new carrier system for the research of crop transgenic safety. Breeding value.
【作者單位】： 天津農(nóng)學(xué)院農(nóng)學(xué)與資源環(huán)境學(xué)院;天津農(nóng)學(xué)院基礎(chǔ)科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(201610061131) 天津市高校創(chuàng)新團(tuán)隊培養(yǎng)計劃(TD12-5017) 天津市千人計劃(高粱抗性生理及遺傳機(jī)理的研究)
【分類號】：Q943.2

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本文編號：2076684