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紅肉蘋果愈傷組織生長素信號相關(guān)基因MdARF3的克隆與表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2018-06-26 00:51

  本文選題:蘋果 + 生長素。 參考:《園藝學(xué)報(bào)》2017年04期


【摘要】:以紅肉蘋果‘紫紅3號’(新疆紅肉蘋果與‘富士’F_1代)的紅色幼嫩葉片為外植體誘導(dǎo)的紅色愈傷組織為試材,初步探討生長素調(diào)控蘋果花青苷代謝機(jī)理。根據(jù)擬南芥AtARF3蛋白序列在蘋果基因組中Blast比對得到一個(gè)生長素信號相關(guān)基因(MDP0000173151),暫命名為MdARF3?寺y序發(fā)現(xiàn)該基因的開放閱讀框長度為2 127 bp,編碼708個(gè)氨基酸。進(jìn)化樹分析表明,MdARF3與AtARF3在同一進(jìn)化支上,推測它們具有相似的功能。愈傷組織在含有0.3 mg·L~(-1) NAA的MS培養(yǎng)基培養(yǎng)2 h之后其MdARF3上調(diào)表達(dá),表達(dá)量極顯著高于無NAA培養(yǎng)基(對照),而CHS、CHI、F3H、DFR、UFGT及LDOX等花青苷合成結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)量均極顯著低于對照,并且MdARF3表達(dá)量與培養(yǎng)基中NAA濃度呈顯著正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為0.98),與愈傷組織花青苷含量呈顯著負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為 0.89),推測MdARF3對培養(yǎng)基中生長素快速做出反應(yīng)調(diào)控花青苷合成;通過原核誘導(dǎo)獲得了MdARF3的重組蛋白,為進(jìn)一步研究MdARF3蛋白在花青苷代謝途徑中的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The red young leaves of red meat apple 'Zihong 3' (Xinjiang red meat apple and 'Fujiao F1 generation) were used as explants to induce red callus. The mechanism of auxin regulating anthocyanin metabolism was studied. According to Arabidopsis thaliana AtARF3 protein sequence, a auxin signaling related gene (MDP0000173151) was obtained by blast alignment in the apple genome, and was tentatively named MdARF3. Cloning and sequencing showed that the open reading frame length of the gene was 2 127 BP, encoding 708 amino acids. The phylogenetic tree analysis shows that MdARF3 and AtARF3 are in the same evolutionary branch, and it is inferred that MdARF3 and AtARF3 have similar functions. The expression of MdARF3 in callus cultured in MS medium containing 0.3 mg / L ~ (-1) NAA for 2 h was significantly higher than that in non-NAA medium (control). The expression of MdARF3 was positively correlated with NAA concentration (correlation coefficient was 0.98) and negatively correlated with anthocyanin content in callus (correlation coefficient was 0.89). It was inferred that MdARF3 could react quickly with auxin to regulate anthocyanin synthesis. The recombinant protein of MdARF3 was obtained by prokaryotic induction, which laid a foundation for further study of the function of MdARF3 protein in anthocyanin metabolism pathway.
【作者單位】: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)作物生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFC0501505) 國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31572091)
【分類號】:S661.1

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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5 孫華;新疆紅肉蘋果PGIP基因的克隆及原核表達(dá)[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

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本文編號:2068298

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