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聚羥基丙烯酸和Van-clear在qRT-PCR法檢測非小細胞肺癌EGFR基因突變中的應用研究

發(fā)布時間:2018-06-14 17:14

  本文選題:聚羥基丙烯酸 + 環(huán)保透明脫蠟液Van-clear ; 參考:《西安交通大學學報(醫(yī)學版)》2017年05期


【摘要】:目的比較環(huán)保固定液聚羥基丙烯酸、環(huán)保透明脫蠟液Van-clear單獨或聯(lián)合替代傳統(tǒng)固定液4%中性緩沖甲醛、傳統(tǒng)透明脫蠟液二甲苯應用于實時熒光定量PCR(qRT-PCR)法,檢測非小細胞肺癌(NSCLC)表皮生長因子受體(EGFR)基因突變率的敏感性、特異性及符合率的差異,評估qRT-PCR法及其環(huán)保技術平臺的臨床應用價值。方法選取中山市博愛醫(yī)院、中山市中醫(yī)院2013年5月至2016年3月期間手術切除的原發(fā)性NSCLC標本91例,同一腫瘤病變部位切取5個樣本,采用隨機數(shù)字表法分為A、B、C、D、E。A組使用4%中性緩沖甲醛固定、二甲苯透明脫蠟制作切片、直接測序法檢測EGFR基因突變;B組使用4%中性緩沖甲醛固定、二甲苯透明脫蠟制作切片、qRT-PCR法檢測EGFR基因突變;C組使用聚羥基丙烯酸固定、二甲苯透明脫蠟制作切片、qRT-PCR法檢測EGFR基因突變;D組使用4%中性緩沖甲醛固定、Van-clear透明脫蠟制作切片、qRT-PCR法檢測EGFR基因突變;E組使用聚羥基丙烯酸固定、Van-clear透明脫蠟制作切片、qRT-PCR法檢測EGFR基因突變。分別測定5組NSCLC中EGFR基因第18、19、20、21號外顯子的突變情況。結果 (1)B、C、D、E組與A組比較,EGFR基因發(fā)生突變?nèi)藬?shù)百分率、基因靶位點突變率的差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05);(2)B、C、D、E組與A組比較,EGFR靶位點突變檢測結果的靈敏度好、特異度強、符合率高。結論聚羥基丙烯酸、環(huán)保透明脫蠟液Van-clear單獨或聯(lián)合替代傳統(tǒng)試劑,應用于qRT-PCR法檢測NSCLC中EGFR基因突變,與以傳統(tǒng)試劑應用于直接測序法的檢測結果一致性好,有在臨床推廣應用的意義和價值。
[Abstract]:Objective to compare the use of polyhydroxy acrylic acid (PAA), environmental transparent dewaxing solution (Van-clear) to replace 4% neutral buffered formaldehyde in traditional fixative solution, and the application of xylene in real-time fluorescence quantitative PCRQRT-PCRmethod. The sensitivity, specificity and coincidence rate of EGF receptor EGFR gene mutation in NSCLC were detected. The clinical application value of qRT-PCR and its environmental protection technology platform was evaluated. Methods 91 cases of primary NSCLC from Zhongshan Boai Hospital and Zhongshan Hospital of traditional Chinese Medicine from May 2013 to March 2016 were selected. The method of random digital table was used to divide the control group into 4% neutral buffered formaldehyde fixation, xylene transparent dewaxing section and 4% neutral buffered formaldehyde fixation to detect EGFR gene mutation in group B by direct sequencing. The EGFR gene mutation was detected by qRT-PCR in transparent dewaxing section of xylene. Group C was immobilized with polyhydroxyacrylic acid. Detection of EGFR gene mutation by qRT-PCR in group D using 4% neutral buffer formaldehyde fixed Van-clear transparent dewaxing section qRT-PCR was used to detect EGFR gene mutation. Group E used polyhydroxyacrylic acid to fix Van-clear transparent dewaxing. EGFR gene mutation was detected by qRT-PCR. The mutation of exon 18 of EGFR gene in 5 groups of NSCLC was determined. Results there was no significant difference in the mutation rate of EGFR gene between group E and group A, and there was no significant difference between group E and group A in the sensitivity, specificity and coincidence rate of detection of EGFR target mutation in group E and group A. Conclusion Polyhydroxy acrylic acid, environmental transparent dewaxing solution Van-clear is used to detect EGFR gene mutation in NSCLC by using qRT-PCR method, which is consistent with the results of direct sequencing with traditional reagent. Has the significance and the value in the clinical popularizing application.
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學附屬中山博愛醫(yī)院病理科;廣東醫(yī)科大學廣東省醫(yī)學分子診斷重點實驗室;廣州中醫(yī)藥大學附屬中山醫(yī)院病理科;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(No.81101843) 廣東省醫(yī)學科學技術研究基金項目(No.A2017321) 廣東省中山市衛(wèi)生和計劃生育局醫(yī)學科研立項課題(No.2014J128)~~
【分類號】:R734.2

【相似文獻】

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9 鄭穎t,

本文編號:2018298


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