發(fā)菜固氮酶nifH基因克隆及其干旱脅迫下的差異表達(dá)
本文選題:發(fā)菜 + 固氮酶。 參考:《西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)》2017年11期
【摘要】:通過(guò)對(duì)發(fā)菜固氮酶H亞基基因(nifH)全長(zhǎng)進(jìn)行克隆、原核表達(dá)和生物信息學(xué)分析,采用qRT-PCR技術(shù),分析不同干旱脅迫下發(fā)菜固氮酶基因nifH在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)變化。結(jié)果表明,根據(jù)特異性引物克隆獲得長(zhǎng)度為894bp的nifH,GenBank登陸號(hào)為BankIt1901364(KU886163)。將nifH在大腸桿菌中表達(dá),獲得約36ku的外源蛋白。生物信息學(xué)分析表明,發(fā)菜nifH與已報(bào)道的多種藍(lán)藻的nifH及推導(dǎo)的氨基酸序列具有較高的相似性,nifH二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)主要由α螺旋、β-折疊、隨機(jī)卷曲和β-轉(zhuǎn)角構(gòu)成。隨藻體含水量的逐漸降低,發(fā)菜nifH在轉(zhuǎn)錄水平上的表達(dá)量逐漸增加,固氮酶活性呈現(xiàn)先增加后下降的趨勢(shì)。研究結(jié)果為進(jìn)一步研究發(fā)菜固氮酶基因的分子結(jié)構(gòu)和發(fā)菜響應(yīng)干旱脅迫的固氮機(jī)制及氮代謝過(guò)程奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:The full length of nitrogenase H subunit (NIF H) was cloned, prokaryotic expression and bioinformatics analysis were used to analyze the expression of nifH at transcription level under different drought stress. The results showed that the accession number of 894bp was BankIt1901364 and KU886163. NifH was expressed in Escherichia coli and the foreign protein of about 36ku was obtained. Bioinformatics analysis showed that nifH and deduced amino acid sequences of nifH and other reported cyanobacteria had high similarity. The secondary and tertiary structures of nifH were mainly composed of 偽 helix, 尾 -fold, random crimp and 尾 -rotation angle. With the decrease of water content in algae, the expression of nifH increased at the transcriptional level, and the activity of nitrogenase increased first and then decreased. The results laid a foundation for further study on the molecular structure of the nitrogenase gene and the mechanism of nitrogen fixation and nitrogen metabolism in lettuce in response to drought stress.
【作者單位】: 寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:寧夏自然科學(xué)基金(NZ1608)~~
【分類號(hào)】:Q943.2
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,本文編號(hào):2012904
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