‘云香’水仙ACC氧化酶基因克隆及遺傳轉(zhuǎn)化
發(fā)布時(shí)間:2018-06-12 18:46
本文選題:水仙 + 基因克隆; 參考:《園藝學(xué)報(bào)》2017年07期
【摘要】:以‘云香’水仙花瓣為試驗(yàn)材料,采用RT-PCR技術(shù)克隆出乙烯生物合成途徑中的關(guān)鍵酶ACC氧化酶(ACO)基因的全長序列1 162 bp,命名為NtACO1(GenBank登錄號為KX082935)。其開放閱讀框(ORF)長度為939 bp,編碼312個(gè)氨基酸。NtACO1蛋白包括ACO家族保守的DIOX_N和20G-FeⅡ_Oxy結(jié)構(gòu)域。分子進(jìn)化樹分析表明,NtACO1蛋白與‘金盞銀臺’水仙親緣關(guān)系最近。通過qRT-PCR檢測NtACO1在‘云香’水仙花朵開放過程中的表達(dá)模式,結(jié)果表明,NtACO1在花瓣和副冠中的表達(dá)量隨著花朵發(fā)育衰老而逐漸上升,并且各個(gè)時(shí)期花瓣中的表達(dá)量都高于副冠,推測NtACO1可能參與了‘云香’花的發(fā)育和衰老。構(gòu)建了NtACO1的正、反義植物表達(dá)載體,并以煙草葉片為外植體,通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化體系,獲得NtACO1過表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株。轉(zhuǎn)基因煙草與野生型相比縮短了營養(yǎng)生長期,開花較早,葉片較少。該研究為進(jìn)一步探究水仙花ACO基因功能,以及延長水仙花花期的分子育種奠定了試驗(yàn)基礎(chǔ)。
[Abstract]:The full-length sequence of ACC oxidase ACO-gene in ethylene biosynthesis pathway was cloned by RT-PCR from the petals of 'Narcissus', named NtACO1 GenBank accession number KX082935. Its open reading frame (ORF) length is 939 BP and encodes 312 amino acids. NtACO1 protein includes the conserved DIOXN and 20G-Fe 鈪,
本文編號:2010700
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