本文選題：烏金豬 + 約大烏豬��； 參考：《動物營養(yǎng)學報》2016年07期

【摘要】：本試驗旨在檢測β防御素-1(p BD-1)、β防御素-2(p BD-2)和β防御素-3(p BD-3)基因在烏金豬和具有烏金豬血緣的約大烏豬不同組織中的表達,并探討東亞飛蝗抗菌活性物質(zhì)(LAAS)對豬胎兒皮膚成纖維細胞(PFSF)免疫應(yīng)激參數(shù)和防御素(p BDs)基因表達的調(diào)節(jié)作用。采用實時熒光定量PCR方法檢測2月齡烏金豬與約大烏豬心臟、肝臟、肺臟、腎臟、空腸、回腸、十二指腸、皮膚、肌肉、胰腺、睪丸或卵巢這12種組織中p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表達差異;采用培養(yǎng)至第4~5代的PFSF,通過脂多糖(LPS)誘導建立免疫應(yīng)激模型,在DMEM/F12培養(yǎng)液中添加不同濃度(0、75、150、300、600和1 200μg/m L)的LAAS,考察LAAS對PFSF免疫應(yīng)激參數(shù)和p BD-1、p BD-2、p BD-3基因表達的影響。結(jié)果表明:1)烏金豬血清溶菌酶(LSZ)活性、免疫球蛋白G(Ig G)含量顯著高于約大烏豬(P0.05),血清一氧化氮(NO)含量極顯著低于約大烏豬(P0.01)。2)約大烏豬大多數(shù)組織中p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表達量高于烏金豬;2個品種豬的p BD-1和p BD-3基因均在皮膚和卵巢中表達量較高,p BD-2基因在肝臟和腎臟中表達量較高。3)300μg/m L LAAS極顯著降低了培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活性(P0.01);LAAS極顯著增加了培養(yǎng)液中NO含量(除75μg/m L組正常細胞外)(P0.01),正常細胞和應(yīng)激細胞均在LAAS濃度為600μg/m L時達到最高;LAAS濃度為0、75和150μg/m L時應(yīng)激細胞一氧化氮合酶(NOS)活性顯著或極顯著高于正常細胞(P0.05或P0.01);添加1 200μg/m L LAAS可極顯著降低培養(yǎng)液中的LSZ活性(P0.01),LAAS濃度為150、300、600和1 200μg/m L時應(yīng)激細胞與正常細胞中LSZ活性差異顯著或極顯著(P0.05或P0.01)。4)應(yīng)激細胞p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表達量均高于正常細胞;當LAAS濃度為150μg/m L時,p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表達量最高。結(jié)果提示,烏金豬和約大烏豬防御素基因的表達存在明顯的品種差異性和組織特異性,適宜濃度的LAAS能夠降低PFSF中LDH活性,提高NO含量及NOS、LSZ活性,上調(diào)應(yīng)激細胞與正常細胞防御素的表達量。
[Abstract]:The aim of this study was to detect the expression of 尾 -defensin -1p BD-1, 尾 -defensin -2pBD-2) and 尾 -defensin -3pBD-3) in different tissues of Wujin pig and about big black pig with blood relationship of Wujin pig. To investigate the effect of LAASA on the immune stress parameters of porcine fetal skin fibroblasts (PFSFs) and the expression of defensin p BDs1 gene. The heart, liver, lung, kidney, jejunum, ileum, duodenum, skin, muscle and pancreas were detected by real-time fluorescent quantitative PCR. The expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in the testis or ovaries was different, and the immune stress model was established by using PFSFs cultured to the 4th generation and induced by lipopolysaccharide (LPSs). To investigate the effects of LAAS on PFSF immune stress parameters and the expression of pBD-2pBD-3 gene in DMEM / F12 medium supplemented with different concentrations of 0 075 150300 600 and 1 200 渭 g / mL, the effects of LAAS on PFSF immune stress parameters were investigated. The results showed that the serum lysozyme (LSZ) activity of wujin pig, The content of immunoglobulin G (IGG) was significantly higher than that of P0.05G, and the content of serum nitric oxide (no) was significantly lower than that of P0.01g. 2) the expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in most tissues of WW pigs was higher than that of Ujin pigs, and the expression levels of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in two breeds of pigs were higher than those of Wujin pigs. The expression of pBD-1 and pBD-3 genes were higher in skin and ovary. The expression of pBD-2 gene in liver and kidney was higher. 300 渭 g / m LAAS significantly decreased the activity of lactate dehydrogenase LDH in the culture medium P0.01 / L LAAS significantly increased the content of no in the culture medium. The activity of nitric oxide synthase (NOSs) in stress cells was significantly or significantly higher than that in normal cells at the concentration of 600 渭 g / mL and 150 渭 g / mL, respectively, when the concentration of LAAS was 600 渭 g / mL, and the activity of NOS in stress cells was significantly higher than that in normal cells (P 0.05 or P 0.05). 1 200 渭 g / m LAAS significantly decreased LSZ activity in culture medium. The difference of LSZ activity between stress cells and normal cells was significant or extremely significant when the concentration of P0.01 渭 g / mL was 150300600 and 1 200 渭 g / mL, respectively (P0.05 or P0.01n.4) the expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in stress cells was significantly lower than that in normal cells (P0.05 or P0.01mLLAAS. 4) the expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes in stress cells was significantly lower than that in normal cells. The quantity was higher than that of normal cells. When the concentration of LAAS was 150 渭 g / mL, the expression of pBD-1pBD-2 and pBD-3 genes was the highest. The results suggested that the expression of defensin gene in Wujin pig and Yorkshire pig had obvious varietal difference and tissue specificity. The suitable concentration of LAAS could decrease LDH activity in PFSF and increase no content and NOSN LSZ activity. Upregulate the expression of defensin in stress cells and normal cells.
【作者單位】： 云南農(nóng)業(yè)大學云南省動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室;
【基金】：云南省重大科技專項基金(2012ZA018) 云南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系2014[云財教]105#、2015[云財教]90#、2016[云財教]112#
【分類號】：S828

【參考文獻】

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本文編號：1992147