茅蒼術內參基因篩選及其在活性成分生物合成研究中的應用
發(fā)布時間:2018-06-07 05:09
本文選題:茅蒼術 + 實時熒光定量PCR。 參考:《植物生理學報》2017年09期
【摘要】:本研究選取茅蒼術轉錄組數據庫中18S rRNA、β-Actin、EF-1α、GAPDH、UBQ1和UBQ2作為候選內參基因,運用實時熒光定量PCR技術分析6種候選內參基因在正常和干旱脅迫條件下不同組織中的表達,并用Delta CT、geNorm、Norm-Finder、Best Keeper及RefFinder等方法評價候選內參基因的表達穩(wěn)定性。結果表明,UBQ2和EF-1α在正常條件下不同組織中的表達均較穩(wěn)定,在干旱脅迫下EF-1α的表達最穩(wěn)定。在此基礎上,以UBQ2作為內參基因,研究正常條件下茅蒼術活性成分生物合成關鍵酶HMGR、FPPS基因在其開花初期不同組織中的表達特性,結果顯示花中HMGR、FPPS基因相對表達量均最高,根莖次之,莖和葉中相對表達量均較低。
[Abstract]:In this study, 18s rRNAs, 尾 -Actinine EF-1 偽 GAPDHU UBQ1 and UBQ2 were selected as candidate internal reference genes in the transcriptome database of Atractylodes macrocephala, and the expression of six candidate internal reference genes in different tissues under normal and drought stress was analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR. The stability of candidate internal reference gene expression was evaluated by Delta CTG Norm Norm Findern Best Keeper and RefFinder. The results showed that the expression of UBQ2 and EF-1 偽 was stable in different tissues under normal condition, and the expression of EF-1 偽 was the most stable under drought stress. On the basis of this, using UBQ2 as internal reference gene, the expression characteristics of HMGRG FPPS gene, a key biosynthesis enzyme of Rhizoma Atractylodes, were studied under normal conditions. The results showed that the relative expression of HMGRG FPPS gene was the highest in different tissues in the early flowering stage of Rhizoma Atractylodes. The relative expression in stem and leaf was lower than that in rhizome.
【作者單位】: 南京中醫(yī)藥大學藥學院;
【基金】:國家自然科學基金(81573520) 江蘇省中藥資源產業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心(ZDXM-3-24) 江蘇省中藥優(yōu)勢學科II期建設(ysxk-2014) “六大人才高峰”高層次人才項目(2012-YY-009) 江蘇省“333高層次人才培養(yǎng)工程”~~
【分類號】:Q943.2;S567.239
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,本文編號:1989949
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