發(fā)布時(shí)間：2018-06-07 00:25

  本文選題：內(nèi)生真菌 + 綠色熒光蛋白　； 參考：《生物技術(shù)通報(bào)》2017年03期

【摘要】：將綠色熒光蛋白基因(gfp)轉(zhuǎn)入到堿蓬內(nèi)生真菌JP4-1中并檢測菌株在水稻幼苗中的定殖情況。采用PEG-Ca Cl2介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化方法將攜帶gfp基因的p CT74質(zhì)粒與菌株基因組整合獲得轉(zhuǎn)化子,用轉(zhuǎn)化子侵染水稻幼苗,熒光顯微鏡下示蹤JP4-1菌株及其侵染特性。轉(zhuǎn)化子經(jīng)連續(xù)傳代6次仍能發(fā)出綠色熒光且熒光強(qiáng)度良好,能夠穩(wěn)定遺傳;經(jīng)PCR驗(yàn)證gfp基因已成功轉(zhuǎn)入JP4-1菌株和水稻幼苗植株內(nèi)并表達(dá)。轉(zhuǎn)化可獲得穩(wěn)定表達(dá)GFP的JP4-1轉(zhuǎn)化子,JP4-1菌株可定殖于水稻幼苗的根、莖、葉,定殖位置為細(xì)胞間隙,其促生作用與野生型菌株無明顯差別。
[Abstract]:The green fluorescent protein gene (GFP) was transferred into the endophytic fungus JP4-1 of Suaeda salsa and the colonization of the strain in rice seedlings was detected. The pCT74 plasmid carrying gfp gene was integrated with the genome of the strain by PEG-Ca Cl2 mediated protoplast transformation. The transformant was used to infect rice seedlings. The strain of JP4-1 and its infection characteristics were traced under fluorescence microscope. After 6 successive passages, the transformants could still emit green fluorescence with good fluorescence intensity and could be inherited stably, and the gfp gene had been successfully transferred into JP4-1 strain and rice seedling plants and expressed by PCR. The stable expression of GFP was obtained by the transformation of JP4-1 transformant JP4-1, which could colonize the root, stem, leaf and colonization of rice seedlings in the intercellular space, and there was no significant difference between the growth promotion and wild-type strains.
【作者單位】： 沈陽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上資助項(xiàng)目(31270369)
【分類號】：S511;Q93

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本文編號：1988819