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利用異源正調(diào)控基因acyB2構(gòu)建埃莎霉素Ⅰ高產(chǎn)菌株

發(fā)布時間:2018-06-06 02:29

  本文選題:埃莎霉素Ⅰ + ″-異戊;D(zhuǎn)移酶基因(ist) ; 參考:《中國生物工程雜志》2017年03期


【摘要】:必特螺旋霉素(bitespiramycin,BT)是以異戊酰螺旋霉素(簡稱為埃莎霉素)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ為主要成分的多組分抗生素。通過阻斷3-O-;D(zhuǎn)移酶基因(sspA),獲得了只產(chǎn)埃莎霉素Ⅰ的WSJ-2菌株,但其發(fā)酵產(chǎn)物中含有大量螺旋霉素,而埃莎霉素Ⅰ含量較低。為提高4″-異戊;D(zhuǎn)移酶基因(ist)在WSJ-2中的表達(dá)水平,從而提高埃莎霉素Ⅰ的產(chǎn)量,首先構(gòu)建了含有ist基因和其正調(diào)控基因acyB2連鎖片段的重組質(zhì)粒pSET152-ia,然后將其導(dǎo)入到埃莎霉素Ⅰ產(chǎn)生菌WSJ-2中,通過具有阿普拉霉素(apramycin)抗性標(biāo)記的鏈霉菌整合型載體pSET152整合到WSJ-2的染色體上,獲得新的埃莎霉素Ⅰ產(chǎn)生菌WSJ-IA。在不同發(fā)酵時間定量檢測ist的表達(dá)水平,WSJ-IA中ist的表達(dá)量要明顯高于WSJ-2。WSJ-IA高產(chǎn)菌株的發(fā)酵單位從(280±20)μg/ml提高至(1160±108)μg/ml,較原始菌株WSJ-2提高了314%,而且在WSJ-IA發(fā)酵產(chǎn)物中埃莎霉素Ⅰ與螺旋霉素Ⅰ含量的比值是WSJ-2的2.4倍左右,說明在引入acyB2基因的同時提高了菌株的發(fā)酵單位和埃莎霉素Ⅰ的產(chǎn)量。
[Abstract]:Bitespiramycin (BTBT) is a multicomponent antibiotic with isovaleryl spiramycin 鈪,

本文編號:1984626

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