發(fā)布時(shí)間：2018-05-31 12:23

  本文選題：綿羊 + 非季節(jié)發(fā)情�。� 參考：《石河子大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：綿羊?qū)儆诩竟?jié)性發(fā)情動(dòng)物,但綿羊季節(jié)性發(fā)情這一特點(diǎn)卻一直制約著綿羊的生產(chǎn)繁殖效率�，F(xiàn)階段,人們常常認(rèn)為綿羊的季節(jié)性發(fā)情受光通路的調(diào)控,針對(duì)這一特點(diǎn)人們初步確定了其光通路調(diào)控模式圖。但在實(shí)際生產(chǎn)中,在非繁殖季節(jié)下飼喂的高營養(yǎng)水平的哈薩克羊也出現(xiàn)了發(fā)情的現(xiàn)象,這一現(xiàn)象說明了不僅僅是光周期對(duì)綿羊發(fā)情起到關(guān)鍵作用,而且營養(yǎng)對(duì)綿羊的發(fā)情表現(xiàn)也存在著一定的作用,那么這一營養(yǎng)水平誘導(dǎo)的發(fā)情機(jī)制與光周期的調(diào)控機(jī)制是否一致呢?針對(duì)這一研究對(duì)綿羊生產(chǎn)具有很大的指導(dǎo)意義。因此,本研究通過數(shù)字基因表達(dá)譜篩選由營養(yǎng)水平變化誘導(dǎo)哈薩克羊非繁殖季節(jié)發(fā)情和乏情的下丘腦、垂體、卵巢中的差異表達(dá)基因,并對(duì)篩選到的發(fā)情相關(guān)的基因進(jìn)行功能初步分析。具體研究內(nèi)容如下:1.建立不同營養(yǎng)水平條件下的哈薩克羊群,在非繁殖季節(jié)觀察并記錄試驗(yàn)綿羊的發(fā)情狀況。乏情季節(jié),分別屠宰3只發(fā)情(EN)、3只發(fā)情(空懷)(ENN)和乏情母羊(AN),分別采集下丘腦(H)、垂體(P)和卵巢(O),共構(gòu)建9個(gè)DGE文庫,通過生物信息學(xué)分析篩選出差異基因。結(jié)果顯示:乏情季節(jié)發(fā)情、發(fā)情(空懷)和乏情綿羊的下丘腦組織比對(duì)到參考基因的序列分別有2,925,936,2,956,401和2,647,042條;乏情季節(jié)發(fā)情、發(fā)情(空懷)和乏情綿羊的垂體與參考基因序列比對(duì)有3,198,493,3,327,125和3,635,448條;乏情季節(jié)發(fā)情、發(fā)情(空懷)和乏情綿羊的卵巢與參考基因序列比對(duì)有3,757,637,3,694,199和3,135,565條;乏情季節(jié)發(fā)情、發(fā)情(空懷)與乏情的下丘腦中的差異表達(dá)基因分別有808和1906個(gè),乏情季節(jié)發(fā)情、發(fā)情(空懷)與乏情的垂體中的差異表達(dá)基因分別有552和1091個(gè),乏情季節(jié)發(fā)情、發(fā)情(空懷)與乏情的卵巢中的差異表達(dá)基因分別有58和201個(gè),與發(fā)情相關(guān)的差異表達(dá)基因分別有13、11、5、4、3和4個(gè),包含有MMP14、CHN2、GNAQ、MEK1等基因。分別從下丘腦、垂體和卵巢中隨機(jī)選擇取幾個(gè)差異表達(dá)量比較高的基因進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果基本與測(cè)序結(jié)果一致。KEGG通路分析表明:差異表達(dá)基因GNAQ在多個(gè)通路中發(fā)揮作用,特別在GnRH信號(hào)通路中,GNAQ位于GnRH受體的下游通路中,很可能間接的作用GnRH來影響發(fā)情。2.通過對(duì)Kiss-1基因和GNAQ基因在綿羊組織的基因表達(dá)定量研究,kiss-1基因作為光通路中的重要基因在各個(gè)組織均有表達(dá),且表達(dá)量比較高,而GNAQ基因只在脾臟,肝臟和下丘腦中的表達(dá)量高,其它組織表達(dá)量很低。通過構(gòu)建pcDNA3.1(+)-GNAQ-GFP過表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染到卵巢顆粒細(xì)胞中,結(jié)果在激光激發(fā)下并未發(fā)現(xiàn)熒光現(xiàn)象,說明GNAQ沒有在卵巢中表達(dá),仍有待研究。通過基因及相關(guān)發(fā)情通路的分析,非繁殖季節(jié)綿羊發(fā)情可能與酪氨酸,葉酸和甘氨酸等多種營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān),酪氨酸通路中的MEK1基因通過GnRH通路作用于FSH和LH;葉酸則可能通過內(nèi)吞作用通路促使雌二醇的產(chǎn)生進(jìn)而影響發(fā)情;甘氨酸通過在甘氨酸,絲氨酸和蘇氨酸代謝中發(fā)揮作用;它們共同作用來影響發(fā)情。
[Abstract]:The results showed that the expression profiles of the hypothalamus , pituitary and ovary of sheep during the non - breeding season had a certain effect on the estrus of sheep . The results showed that the expression profiles of the hypothalamus , pituitary and ovary in the non - breeding season had a certain effect on the sheep ' s estrus .
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S826

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1959667