本文選題：質(zhì)粒 + 耐多藥�。� 參考：《西南醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：目的:自從20世紀(jì)90年代末期第一次發(fā)現(xiàn)qnr基因后,全國各地就陸陸續(xù)續(xù)有報(bào)道稱發(fā)現(xiàn)其同源性基因及相應(yīng)亞型,且各國家、各地區(qū)的檢出情況及同源性基因的分布情況各不相同。本次研究的目的在于了解瀘州地區(qū)大腸埃希菌的藥敏情況,及首次探討qnrB、qnrS、qnrA基因的分布情況和耐藥特征,以更好的為臨床用藥提供依據(jù)。方法:1.實(shí)驗(yàn)菌株的準(zhǔn)備:將臨床分離的155株細(xì)菌復(fù)蘇于LB培養(yǎng)基上,挑選生長良好的菌落1-2個(gè)接種于TSB肉湯營養(yǎng)液中培養(yǎng)18-24小時(shí),菌液渾濁后置于4℃冰箱保存,以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)所用。2.PCR檢測:根據(jù)細(xì)菌TIANprep Mini Plasmid Kit使用說明書,對已培養(yǎng)的細(xì)菌進(jìn)行質(zhì)粒DNA的提取,使用3對已合成的引物及相關(guān)反應(yīng)液,配制25ul反應(yīng)體系,進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后將產(chǎn)物用于瓊脂糖凝膠電泳,在凝膠DNA成像儀下觀察,將陽性條帶產(chǎn)物圖照相及保存。將條帶清晰的PCR陽性產(chǎn)物送上海生工公司測序。3.藥物敏感性試驗(yàn):即K-B法(紙片擴(kuò)散法),對155株大腸埃希菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)分析,觀察其對如下抗生素的耐藥情況:阿米卡星(AMK)、萘啶酸(NA)、慶大霉素(GEN)、環(huán)丙沙星(CIP)、莫西沙星(MXF)、左氧氟沙星(LEV)、頭孢噻肟(CTX)、諾氟沙星(NOR)、頭孢他啶(CAZ)、亞胺培南(IPM)、頭孢哌酮/舒巴坦(SCF)、頭孢噻肟/克拉維酸(CTC)、頭孢他啶/克拉維酸(CAC)。4.ESBLs篩選試驗(yàn):用CTX及CTC、CAZ及CAC抗生素紙片做初篩和確認(rèn)試驗(yàn),結(jié)果的判斷參照NCCLS(美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì))的標(biāo)準(zhǔn)。加克拉維酸及不加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑相差大于等于5mm,即可確認(rèn)為esbls菌株。結(jié)果:1.pcr結(jié)果:檢出qnr陽性菌共29株(20.65%)。其中qnra檢出4株,占2.58%;qnrb檢出19株,12.26%;qnrs檢出9株,占5.81%。其中3株細(xì)菌同時(shí)檢出不同型qnr基因,分別是qnra及qnrb、qnrb及qnrs、qnra及qnrs。2.藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1)155株大腸埃希菌對mxf及imp敏感率達(dá)100%;對scf敏感性較高,達(dá)98.71%,對na、caz、gen、ctx、amk、scf、cip、lev、nor的耐藥率分別為70.97%、29.03%、49.03%、58.06%、2.58%、1.29%、51.61%、33.54%、54.84%。2)耐多藥菌株占28.39%、雙耐菌株占25.16%,單耐菌株占26.45%,全敏菌株占20%。耐多藥模式表型以耐caz/ctx+gen+na/nor/cip為主,共計(jì)39株,占耐多藥菌的88.64%;雙耐模式表型以耐na/nor/cip+gen為主,共計(jì)23株,占雙耐菌的58.97%;單耐表型以耐na/cip/nor為主,共計(jì)25株,占單耐菌的60.98%。3.esbls檢出情況:155株細(xì)菌中,共檢出esbls(+)菌總計(jì)97株,占62.58%。耐多藥菌株中,97.72%的菌株為esbls(+)菌,雙耐藥菌株中esbls(+)占89.74%,單耐藥菌株中esbls(+)占46.34%。4.qnr基因的分布情況:1)qnr陽性菌株與陰性菌株對11種抗生素(包括喹諾酮類藥物)耐藥率的比較中,其耐藥率無顯著差別(p值均大于0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)無意義)。2)qnr基因?qū)sbls(+)菌及esbls(-)菌的影響的比較中,其p=0.001,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。qnr陽性菌株主要分布在雙耐及耐多藥菌株中,達(dá)72.41%,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,p值小于0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.瀘州地區(qū)臨床分離的實(shí)驗(yàn)菌株對三類常用抗生素的耐藥情況仍較普遍,且其耐多藥、雙耐藥情況較常見,但均較過去有所改善。2.瀘州地區(qū)臨床分離的大腸埃希菌esbls(+)菌檢出率達(dá)62.58%,且主要分布在耐多藥菌及雙耐藥菌株中。3.瀘州地區(qū)的大腸埃希菌qnr基因檢測率達(dá)20.65%,且主要位于ESBLs(+)菌中。4.qnr基因主要分布在耐多藥及雙耐藥模式菌株中。
[Abstract]:Objective : To study the susceptibility of Escherichia coli in Luzhou area . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . Polymerase chain reaction was carried out on 155 strains of Escherichia coli . There were 19 strains of qnrb , 19.03 % , 58.06 % , 25.16 % , 49.03 % , 58.06 % , 2.58 % , 98.71 % , 51.61 % , 33.54 % , 54.84 % respectively . The results showed that the detection rate of esbls ( + ) and esbls ( + ) was 62.58 % .
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5

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本文編號：1957062