本文選題：固本防哮飲 + 哮喘　； 參考：《南京中醫(yī)藥大學》2016年碩士論文

【摘要】：目的：探討中藥復方固本防哮飲對哮喘易感基因血清類粘蛋白1樣蛋白3(orosomucoid 1-like protein 3,ORMDL3)以及信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1, STAT1)的調(diào)控作用,進一步揭示固本防哮飲防治哮喘的機制。方法：體外培養(yǎng)人支氣管上皮細胞(human bronchial epithelial cells,16HBE),分為正常組、模型組、固本防哮飲組及孟魯司特鈉組,利用白介素-4(interleukin-4, IL-4)誘導16HBE構(gòu)建哮喘細胞模型,并分別予空白血清及含藥血清進行干預；運用實時熒光定量-PCR (Real-time PCR)、免疫印跡法(Western blotting, WB)、免疫熒光法(immunofluorescence, IF)從基因、蛋白水平檢測16HBE細胞ORMDL3、STAT1的表達及蛋白亞細胞定位。結(jié)果：ORMDL3蛋白主要表達于16HBE細胞胞質(zhì)中表達,STAT1蛋白可表達于16HBE細胞胞質(zhì)及胞核內(nèi)；WB結(jié)果顯示,與正常組比較,模型組ORMDL3、STAT1蛋白表達顯著增加(P0.05,P0.01)；與模型組比較,固本防哮飲組ORMDL3及STAT1蛋白表達均顯著下降(P0.05)；PCR結(jié)果顯示,與正常組比較,模型組ORMDL3、STAT1 mRNA含量升高,但二者無顯著性差異(P0.05),固本防哮飲組較模型組細胞中ORMDL3、STAT1 mRNA表達水平下降,無顯著性差異(P0.05)；相關性分析顯示,ORMDL3 mRNA及STAT1 mRNA表達存在正相關(Pearson=0.858, P0.01)。結(jié)論：體外實驗表明,固本防哮飲含藥血清對哮喘易感基因ORMDL3及轉(zhuǎn)錄因子STAT1的表達有一定的調(diào)控作用,STAT1參與固本防哮飲對哮喘易感基因ORMDL3的調(diào)控可能是固本防哮飲防治哮喘作用的內(nèi)在機制。
[Abstract]:Objective: to investigate the regulatory effects of Gubenfangxiao Yin (GBFY) on serum mucin-like protein (3(orosomucoid 1-like protein _ 3) and signal transduction and transcription activator (1(signal transducer and activator of transcription _ 1, STAT _ 1) of susceptibility gene to asthma. Further reveal the mechanism of Guben Fangxiao Yin in prevention and treatment of asthma. Methods: human bronchial epithelial cells were cultured in vitro and divided into normal group, model group, Gubenfangxiao decoction group and montelukast sodium group. The asthmatic cell model was induced by interleukin-4 (IL-4). The expression and subcellular localization of ORMDL3T1-STAT1 in 16HBE cells were detected by real-time fluorescence quantification-PCR real-time PCRG, Western blotting, WBX, and immunofluorescence fluorescence assay (IFFI) respectively in blank serum and drug-containing serum, and the expression of ORMDL3T1-STAT1 and protein subcellular localization in 16HBE cells were detected by Western blotting, Western blotting, immunoblorescence (WBX) and immunofluorescence assay. Results the expression of statin T1 protein in the cytoplasm of 16HBE cells was mainly expressed in the 16HBE cells. The results showed that the expression of STAT1 protein in the model group was significantly higher than that in the normal group, and that in the model group was significantly higher than that in the model group, while in the model group, the expression of STAT1 protein in the cytoplasm and nucleus of the 16HBE cells was significantly higher than that in the control group. Compared with the normal group, the expression of ORMDL3 and STAT1 protein in the model group increased, but there was no significant difference between the two groups (P 0.05). The expression of ORMDL3T1STAT1 mRNA in the Guben Fangxiao group was lower than that in the model group. There was no significant difference in the expression of ORMDL3 mRNA and STAT1 mRNA, but there was a positive correlation between the expression of ORMDL3 mRNA and STAT1 mRNA. Conclusion: in vitro experiments show that, The expression of susceptibility gene ORMDL3 and transcription factor STAT1 in the serum of Guben Fangxiao Yin was regulated to some extent. STAT1 involved in the regulation of Guben Fangxiao Yin on the asthma susceptibility gene ORMDL3 may be the internal mechanism of Guben Fangxiao Yin to prevent and cure asthma.
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R285

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本文編號：1951965