本文選題：散白蟻 + 白蟻卵��； 參考：《西北大學》2017年碩士論文

【摘要】：尖唇散白蟻Reticulitermes aculbialis和黃胸散白蟻R.flaviceps是我國重要的白蟻危害種類。本研究以尖唇散白蟻和黃胸散白蟻為材料,通過建立雌雌配對組(FF組)和雌雄配對組(FM組)人工巢群,采用顯微組織觀察、熒光染色、石蠟切片、熒光定量PCR、統(tǒng)計學分析等技術,系統(tǒng)地研究了兩個種的產(chǎn)卵量、卵孔數(shù)、卵巢發(fā)育、未受精卵胚胎形成及發(fā)育相關基因的表達量,并對比了具有孤雌生殖能力的尖唇散白蟻和不具有孤雌生殖能力的黃胸散白蟻胚胎發(fā)育過程中在形態(tài)學與遺傳學水平上的差異,旨在探究白蟻孤雌生殖的影響因子與調(diào)控機制。研究結論如下。(1)依據(jù)卵巢中最大卵母細胞的成熟程度,將卵巢分為五個階段,A:前卵黃形成期卵母細胞階段,B:早期卵黃形成期卵母細胞階段,C:后期卵黃形成期卵母細胞階段,D:成熟卵母細胞階段,E:側(cè)輸卵管卵母細胞階段。我們發(fā)現(xiàn)黃胸散白蟻FF組和FM組卵巢處在A和B階段的總比率分別為53.33%和58.33%,尖唇散白蟻FF組和FM組處在C和D階段的總比率分別為99.98%和75%,表明尖唇散白蟻卵巢發(fā)育與黃胸散白蟻卵巢相比更成熟。尖唇散白蟻和黃胸散白蟻FF組初建巢到產(chǎn)卵的時間間隔分別為35.12±2.59天和26.64±3.78天,八月份單個巢平均月產(chǎn)卵量分別為18.24±3.18,11.53±4.51,九月份單個巢平均月產(chǎn)卵量分別為11.16±4.26,3.67±1.24,表明尖唇散白蟻FF組產(chǎn)卵量要高于黃胸散白蟻FF組,且黃胸散白蟻九月份產(chǎn)卵量迅速降低。尖唇散白蟻FF組和FM組,黃胸散白蟻FF組和FM組的卵孔數(shù)分別為6.31±1.89,8.18±3.22,8.15±2.67,8.43±3.05,除黃胸散白蟻FF組卵孔數(shù)顯著低于其他各組外,其他組間均無顯著性差異。(2)尖唇散白蟻與黃胸散白蟻卵巢中成熟卵母細胞均存在一個卵核,剛產(chǎn)出孤雌卵存在2-5個卵核,表明兩個種卵母細胞都在排卵過程中被激活且發(fā)生1-2次卵裂。尖唇散白蟻孤雌卵卵核數(shù)在產(chǎn)出5h為16-22個,10h為35-42個,24h為51-60個,48h為67-84個,卵裂速度逐漸減慢,且卵核向卵后端移動,3-5d形成胚盤,7-10天胚帶形成,10-15d胚帶延伸;黃胸散白蟻孤雌卵卵核數(shù)在產(chǎn)出5h為6-10個,48h為28-37個,5-7d為71-85個,且卵核移動至卵后端;黃胸散白蟻卵裂速度顯著低于尖唇散白蟻,且8-10d時約86%的孤雌卵發(fā)育停滯在胚盤形成期,停滯卵卵黃細胞成塊狀聚集在卵的中央,卵兩端呈中空狀態(tài)。(3)我們測定了 8種與發(fā)育相關的基因在黃胸散白蟻FF組和尖唇散白蟻FF組中的表達量。對比同一個種內(nèi)雌蟲與卵巢的表達量,除尖唇散白蟻csf基因表達量在卵巢和成蟲中無顯著性差異外,黃胸散白蟻csf基因以及兩個種中的cdc2,cyclin B,cyclin B3,mapkapk,cdc42,tnk2,ssp4基因在雌性生殖器官中的表達量都顯著高于同種雌性成蟲(P0.05),表明這些基因在卵巢中的表達上調(diào);對比同一個種卵巢與產(chǎn)出的卵的基因表達量,兩個種卵巢中cdc2,cyclin B,cyclin B3,mapkapk,cdc42,ssp4基因以及尖唇散白蟻中tnk2基因的表達量均顯著高于其在相同種產(chǎn)出的卵中的表達量(P0.05),其余無明顯差異,可能是由于卵產(chǎn)出后與發(fā)育相關的母源mRNA迅速降解。兩個種間比較,尖唇散白蟻雌蟲的cyclin,cyclinB3基因表達量顯著高于黃胸散白蟻雌蟲;cdc2,cyclin B,cyclin B3,mapkapk,cdc42,tnk2基因在尖唇散白蟻卵巢中的表達量顯著高于黃胸散白蟻卵巢,與之相反csf基因在黃胸散白蟻卵巢中的表達量顯著高于尖唇散白蟻卵巢,推測上述7個基因與卵巢發(fā)育和卵子成熟有關;尖唇散白蟻卵的tnk2基因含量顯著高于黃胸散白蟻卵(P0.05),表明該基因可能與孤雌卵胚胎發(fā)育有關。
[Abstract]:Reticulitermes aculbialis and termite R.flaviceps are important species of termites in China. This study uses termite and yellow thorax termites as materials. By setting up female paired group (FF group) and male and female group (FM group) artificial nests, microtissue observation, fluorescent staining, paraffin section and fluorescence quantitative PCR are used. A systematic study of two species of oviposition, number of ovum, ovarian development, the formation of unfertilized eggs and the expression of genes related to development, and the comparison of the morphological and genetic water in the development of the embryo of the termites with the parthenogenetic ability of the parthenogenetic and the non parthenogenetic ability of the Yellow thorax termites. The conclusion is to explore the influencing factors and regulation mechanism of termite parthenogenesis. (1) according to the maturity of the largest oocyte in the ovary, the ovary is divided into five stages, the oocyte stage of A: before the yolk formation stage, the oocyte stage in the early yolk formation stage of B: and the oocyte stage in the late yolk formation stage of C:, D: mature oocyte stage and E: side oviduct oocyte stage. We found that the total ratio of group FF and FM in A and B stages were 53.33% and 58.33% respectively. The total ratio of the FF group and FM group at the C and D stages was 99.98% and 75% respectively. The time interval between the first built nest and the spawning in the FF group was 35.12 + 2.59 days and 26.64 + 3.78 days respectively. The average monthly egg production of the single nest in August was 18.24 + 3.18,11.53 4.51 respectively. The average monthly egg production of single nest in September was 11.16 + 4.26,3.67 + 1.24 respectively, indicating the oviposition amount of the FF group of termites apex. It was higher than group FF of termites yellow thorax, and the number of eggs of termite in September was reduced rapidly. The number of egg holes in group FF and FM, FF and FM in group FM of yellow thorax scattered termites were 6.31 + 1.89,8.18 + 2.67,8.43 + 2.67,8.43, respectively, and the number of ovum holes in group FF was significantly lower than that of the other groups. (2) There is an egg nucleus in the mature oocytes of the termite and the termite ovary of the Yellow thorax termite, and there are 2-5 egg nuclei in the parthenogenetic eggs, indicating that two ovules are activated in the process of ovulation and 1-2 cleavage. The number of egg nuclei of the oocyte of the apex termites is 16-22, 35-42, 51-60 24h, and 67-84 48h. The cleavage speed gradually slowed, and the egg nucleus moved to the back of the egg, 3-5d formed the embryo disc, formed the embryo zone in 7-10 days and extended the 10-15d embryo zone; the number of egg nuclei of the oocyte of termites of termites yellow thorax was 6-10, 28-37 48h and 71-85 5-7d, and the egg nucleus moved to the back end of the egg; the cleavage rate of the Yellow thorax scattered white ants was significantly lower than that of the apex labial termites, and about 86% 8-10d when 8-10d. The development of parthenogenetic eggs stagnated at the stage of embryonic disc formation, and the stagnant oval cells were lumped in the center of the egg, and the two ends of the eggs were hollow. (3) we measured the expression of 8 developmental related genes in the group FF of termites yellow thorax and the FF termites of the apex labial termites. The expression of the female and ovary in the same species was compared, and the CSF base of the termites was compared to the apex labial termites. The expression of CSF gene in yellow thorax termites and cdc2, cyclin B, cyclin B3, mapkapk, Cdc42, tnk2, Ssp4 genes in female reproductive organs were significantly higher than those of the same female adult (P0.05) in the two species, and the expression of these genes in the ovary was up. The expression of CDC2, cyclin B, cyclin B3, mapkapk, Cdc42, Ssp4, and sharp labial termites were significantly higher in the expression of tnk2 genes in the two species of ovaries than in the eggs produced in the same species (P0.05), and the rest was not significantly different. The expression of cyclin and cyclinB3 gene in the cyclin and cyclinB3 gene of termites was significantly higher than that of termites of yellow thorax; cdc2, cyclin B, cyclin B3, mapkapk, Cdc42, tnk2 genes were significantly higher in the ovaries of the termite ovaries than the Yellow thorax termite ovary, and the expression of the reverse CSF gene in the Yellow thorax termite ovary was significant. The above 7 genes are related to ovarian development and egg maturation, and the tnk2 gene content of termite eggs is significantly higher than that of yellow termites (P0.05), indicating that the gene may be related to the development of parthenogenetic eggs.
【學位授予單位】：西北大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：Q963

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本文編號：1950262