蘋(píng)果MdMYB2基因的克隆及功能鑒定
本文選題:蘋(píng)果 + MdMYB; 參考:《園藝學(xué)報(bào)》2017年12期
【摘要】:以‘嘎拉’蘋(píng)果為材料,采用同源克隆和PCR技術(shù)分離了蘋(píng)果基因MdMYB2(基因序列號(hào):MDP0000823458)。MdMYB2的開(kāi)放閱讀框(ORF)長(zhǎng)度為873 bp,編碼含有290個(gè)氨基酸的蛋白,預(yù)測(cè)其蛋白質(zhì)分子量為32.92 kD,等電點(diǎn)為4.91。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析顯示,蘋(píng)果MYB2與梨MYBL2親緣關(guān)系最近,同源性最高。組織表達(dá)分析表明,MdMYB2在蘋(píng)果的各個(gè)組織均有表達(dá),在莖和果實(shí)中表達(dá)相對(duì)較高。MdMYB2的表達(dá)明顯受鹽脅迫的誘導(dǎo)。構(gòu)建了MdMYB2的表達(dá)載體,并通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化得到了轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果愈傷和轉(zhuǎn)基因擬南芥植株?剐栽囼(yàn)表明,過(guò)量表達(dá)MdMYB2明顯提高了轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果愈傷對(duì)鹽脅迫的抗性。此外,異位表達(dá)MdMYB2也能提高擬南芥對(duì)鹽脅迫的抗性,以上試驗(yàn)結(jié)果表明MdMYB2在植物鹽脅迫響應(yīng)中發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:Using 'Gala' apple as material, MdMYB2 gene was isolated by homologous cloning and PCR technique. The ORFlength of MdMYB2 (gene sequence number: MDP00823458N. MdMYB2) was 873 BP, encoding 290-amino acid protein. The molecular weight of MdMYB2 gene was 32.92 kDand the isoelectric point was 4.91. Phylogenetic tree analysis showed that apple MYB2 had the highest homology with pear MYBL2. Tissue expression analysis showed that MdMYB2 was expressed in all tissues of apple, and the expression of MdMYB2 in stem and fruit was relatively high. The expression of MdMYB2 was obviously induced by salt stress. The expression vector of MdMYB2 was constructed and transgenic apple callus and transgenic Arabidopsis plants were obtained by Agrobacterium tumefaciens mediated genetic transformation. The results of resistance test showed that overexpression of MdMYB2 significantly increased the resistance of transgenic apple callus to salt stress. In addition, the heterotopic expression of MdMYB2 could also increase the resistance of Arabidopsis thaliana to salt stress. The results indicated that MdMYB2 played an important role in the response of plants to salt stress.
【作者單位】: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝科學(xué)與工程學(xué)院作物生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)試驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31601742,31772275,31471854) 山東省產(chǎn)業(yè)體系崗位專家項(xiàng)目(SDAIT-06-03)
【分類號(hào)】:S661.1
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