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控制辣椒辣味基因Pun1的克隆及表達(dá)(英文)

發(fā)布時間:2018-05-26 19:53

  本文選題:辣味 + Pun基因瞬時表達(dá)。 參考:《Agricultural Science & Technology》2016年11期


【摘要】:[目的]對控制辣椒辣味基因pun1的克隆及表達(dá)進(jìn)行研究。[方法]以益都紅(Capsicum annuum L)為材料,獲得Capun1基因c DNA序列,全長1 457 bp,編碼440個氨基酸;研究了其瞬時表達(dá)、原核表達(dá)和實(shí)時熒光定量表達(dá)。[結(jié)果]系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示,CAPUN1與同屬C.chinense辣椒PUN1遺傳距離最近,為0.019 3。構(gòu)建植物表達(dá)載體p CAM-Pun1-GFP轉(zhuǎn)化煙草瞬時表達(dá),發(fā)現(xiàn)融合基因Pun1::GFP編碼的蛋白定位在細(xì)胞膜上。構(gòu)建原核表達(dá)載體,通過SDS-PAGE和Western Blot檢測,得到了一個分子量為63 ku的誘導(dǎo)蛋白。實(shí)時熒光定量表達(dá)發(fā)現(xiàn)Pun1基因在花后30 d表達(dá)量最高,而后開始下降,花后40和45 d基本不表達(dá)。[結(jié)論]該研究為研究辣椒辣味基因Pun1的調(diào)控分子機(jī)制提供了信息和參考。
[Abstract]:[objective] to study the cloning and expression of pun1 controlling chili hot taste gene. [methods] the c DNA sequence of Capun1 gene was obtained by using Capsicum annuum L as the material. The cDNA encoding 440 amino acids was obtained, and its transient expression, prokaryotic expression and real-time fluorescence quantitative expression were studied. [results] phylogenetic analysis showed that the genetic distance of capsicum was 0.019 3. A plant expression vector, p CAM-Pun1-GFP, was constructed to transform tobacco transient expression. It was found that the protein encoded by the fusion gene Pun1::GFP was located on the cell membrane. The prokaryotic expression vector was constructed and a 63 ku inducible protein was obtained by SDS-PAGE and Western Blot detection. Real-time fluorescence quantitative expression showed that the expression of Pun1 gene was the highest at 30 days after anthesis, then decreased, and was not expressed at 40 and 45 days after anthesis. [conclusion] this study provides information and reference for studying the molecular mechanism of Pun1 regulation.
【作者單位】: 吉林大學(xué)植物科學(xué)學(xué)院;
【基金】:Supported by College Student Innovation Fund Project of Jilin University(2015821243)~~
【分類號】:S641.3

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本文編號:1938702

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