本文選題：單增李斯特菌 + LLO蛋白　； 參考：《江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年01期

【摘要】：為獲得單增李斯特菌溶血素(Listeriolysiono,LLO)蛋白及其多克隆抗體。根據(jù)單增李斯特菌溶血素蛋白的基因Hly序列設(shè)計(jì)了一對(duì)特異性引物,擴(kuò)增出Hly基因,克隆入原核表達(dá)載體p ET-32a,并轉(zhuǎn)化于大腸桿菌BL21中,在誘導(dǎo)劑IPTG的作用下重組LLO蛋白成功表達(dá)。SDS-PAGE結(jié)果表明重組蛋白分子量約為69.3 ku,且主要以包涵體形式表達(dá)LLO蛋白。將重組蛋白純化后免疫新西蘭大白兔,獲得兔抗LLO抗體。Western-blot檢測(cè)到一條約69.3 ku的特異性條帶,表明該抗體具有較強(qiáng)的特異性。單增李斯特菌溶血素基因Hly在大腸桿菌中已成功表達(dá),且制備的多克隆抗體可用于LLO蛋白的檢測(cè)。
[Abstract]:To obtain Listeria monocytogenes hemolysin low) protein and its polyclonal antibody. According to the Hly sequence of the hemolysin protein of Listeria monocytogenes, a pair of specific primers were designed, the Hly gene was amplified, cloned into prokaryotic expression vector pET-32a, and transformed into Escherichia coli BL21. The recombinant LLO protein was successfully expressed by the inducer IPTG. SDS-PAGE showed that the molecular weight of the recombinant protein was about 69.3ku. and the LLO protein was mainly expressed in the form of inclusion body. The recombinant protein was purified and immunized to New Zealand white rabbits, and a specific band of 69.3 ku was detected by Western blot. The results showed that the antibody had strong specificity. The hemolysin gene Hly of Listeria monocytogenes has been successfully expressed in Escherichia coli and the polyclonal antibody can be used for the detection of LLO protein.
【作者單位】： 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院江蘇省獸用生物制藥高技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31302096) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2011536) 江蘇省“333人才工程” 江蘇省“六大人才高峰”項(xiàng)目~~
【分類號(hào)】：R378

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1927107