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轉(zhuǎn)BADH基因玉米與非轉(zhuǎn)化受體生長、生理特性及農(nóng)藝性狀比較

發(fā)布時(shí)間:2018-05-22 11:32

  本文選題:BADH基因 + 玉米(Zea。 參考:《山西師范大學(xué)》2016年碩士論文


【摘要】:玉米是我國重要的糧食和飼料作物,在我國占據(jù)極其重要的位置。由于現(xiàn)如今土地干旱和鹽堿化程度越來越嚴(yán)重,因此,研究和培育抗旱耐鹽植物迫在眉睫。在干旱脅迫下,甜菜堿作為一種有效的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),可以在調(diào)節(jié)滲透方面發(fā)揮巨大作用。BADH(Betaine aldehydedehydrogenase)是合成甜菜堿的關(guān)鍵酶之一,通過基因工程手段將BADH基因?qū)胗衩字仓?從而獲得抗旱性玉米,這對提高農(nóng)作物產(chǎn)量意義重大。本研究所采用的材料為T4代轉(zhuǎn)BADH基因玉米植株,是通過花粉介導(dǎo)法獲得的。通過對轉(zhuǎn)基因玉米與非轉(zhuǎn)基因在生長特性、生理和代謝特征、農(nóng)藝性狀以及與環(huán)境相互作用等方面的比較研究,為使用該基因轉(zhuǎn)化方法獲得的轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化生產(chǎn)提供了必須的基礎(chǔ)研究,這對全面理解轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)化受體二者實(shí)質(zhì)等同意義重大。主要研究結(jié)果如下:1、在干旱脅迫下,BADH玉米長勢較非轉(zhuǎn)化受體植株好,株高、干重和鮮重比同期非轉(zhuǎn)化受體分別高112.1%,105.4%和54.3%,表現(xiàn)出較好的抗旱性能;在正常水分條件下,兩組玉米長勢基本一致,株高、干重和鮮重分別比同期非轉(zhuǎn)化受體植株高7.18%、4.26%和0.60%,但是差異均不顯著。2、在干旱脅迫下,轉(zhuǎn)BADH基因玉米的可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸和甜菜堿含量比非轉(zhuǎn)化受體分別高33.45%,92.65%,690%和211.3%,表明其具有更好的滲透調(diào)節(jié)能力;在正常水分條件下,轉(zhuǎn)BADH基因玉米的可溶性糖、脯氨酸和甜菜堿含量分別比非轉(zhuǎn)化受體分別高4.42%,21.72%和9.5%,可溶性蛋白含量比非轉(zhuǎn)化受體低67.69%,這些物質(zhì)的變化可能是由于植物通過自我保護(hù)機(jī)制調(diào)節(jié)體內(nèi)代謝所致。3、在干旱脅迫下,BADH玉米的相對電導(dǎo)率、超氧陰離子自由基和丙二醛含量比非轉(zhuǎn)化受體分別低66%、138%和127%,表明在干旱脅迫下葉片受到較輕程度損傷;在正常水分條件下,BADH玉米葉片相對電導(dǎo)率、超氧陰離子自由基比非轉(zhuǎn)化受體分別高185%、91.3%,丙二醛含量比非轉(zhuǎn)化受體低127%,表明BADH玉米葉片受到了一定的損傷,積累了較多的有害產(chǎn)物。4、在干旱脅迫下,BADH玉米的SOD活性和POD活性比非轉(zhuǎn)化受體分別高33%和36%;在正常水分條件下,BADH玉米SOD活性比非轉(zhuǎn)化受體分別高80%和9.8%,表明轉(zhuǎn)基因植株具有較好的活性氧清除能力。5、通過對轉(zhuǎn)BADH基因玉米與非轉(zhuǎn)化對照玉米穗的形態(tài)觀察和考種發(fā)現(xiàn),兩組玉米在主要農(nóng)藝性狀方面無顯著差異。6、BADH玉米與非轉(zhuǎn)化受體植株的根部附近土壤細(xì)菌、放線菌和真菌數(shù)量均沒有顯著差異,初步表明,兩組玉米對微生物多樣性的影響相同;7、半定量RT-PCR和Real-time PCR分析的結(jié)果表明,BADH基因在轉(zhuǎn)錄水平得以表達(dá),而且在干旱逆境中,BADH基因的相對表達(dá)量比正常水分供應(yīng)下高。
[Abstract]:Corn is an important food and feed crop in China, and occupies an extremely important position in our country. Because the soil drought and salinization are becoming more and more serious nowadays, it is urgent to study and cultivate drought-resistant and salt-tolerant plants. Under drought stress, betaine, as an effective osmotic regulator, can play an important role in the regulation of osmotic activity. Betaine Aldehyde dehydrogenase is one of the key enzymes for the synthesis of betaine. The BADH gene was introduced into maize plants by genetic engineering. So as to obtain drought-resistant maize, which is of great significance to improve crop yield. The material used in this study was T 4 transgenic maize with BADH gene, which was obtained by pollen mediated method. By comparing the growth characteristics, physiological and metabolic characteristics, agronomic characters and interaction with environment of transgenic maize and non-transgenic maize, It provides the necessary basic research for the commercial production of transgenic crops obtained by using the method of gene transformation, which is of great significance for the comprehensive understanding of the substantive equivalence between transgenic crops and non-transformed receptors. The main results were as follows: under drought stress, the plant height, dry weight and fresh weight of BADH maize were better than that of non-transformed receptor plants, and the plant height, dry weight and fresh weight were higher than those of non-transformed receptor plants by 105.4% and 54.3%, respectively, under drought stress. The plant height, dry weight and fresh weight of the two groups were 7.18% and 0.60% higher than those of the non-transformed receptor plants, respectively, but the difference was not significant. Under drought stress, the soluble sugar and protein of the transgenic maize with BADH gene were increased. The contents of proline and betaine were 33.45 ~ 92.65% and 211.3% higher than those of non-transforming receptor, respectively, which indicated that proline and betaine had better osmotic regulation ability, and the soluble sugar of BADH transgenic maize was higher than that of normal water. The contents of proline and betaine were 4.42% and 9.5% higher than those of the non-transforming receptor, respectively, and the soluble protein content was 67.69% lower than that of the non-transforming receptor. The changes of these substances may be due to the regulation of metabolism in the body by the self-protective mechanism. The relative conductivity of BADH maize under drought stress, The contents of superoxide anion free radicals and malondialdehyde were 66 138% and 127% lower than those of non-transformed receptors, respectively, indicating that the leaves were slightly damaged under drought stress, and the relative electrical conductivity of leaves of BADH maize was decreased under normal water condition. Superoxide anion free radicals were higher than non-transformant receptors, and malondialdehyde content was 127% lower than that of non-transforming receptors, indicating that BADH maize leaves were damaged to some extent. Under drought stress, the SOD activity and POD activity of Badh maize were 33% and 36% higher than that of non-transformed receptor, respectively, and the SOD activity of BADH maize was 80% and 9.8% higher than that of non-transformed receptor under normal water condition. Because the plants have better scavenging ability of active oxygen species, the ear morphology of transgenic maize with BADH gene and that of non-transformed maize were observed and tested. There was no significant difference in main agronomic characters between the two groups. There was no significant difference in the number of soil bacteria, actinomycetes and fungi between the two groups. The results of semi-quantitative RT-PCR and Real-time PCR analysis showed that the BADH gene was expressed at the transcriptional level, and the relative expression of BADH gene in drought stress was higher than that in normal water supply.
【學(xué)位授予單位】:山西師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S513

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本文編號:1921888

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