鯉皰疹病毒Ⅱ型ORF4基因的克
發(fā)布時間:2018-05-19 17:52
本文選題:鯉皰疹病毒Ⅱ型 + ORF; 參考:《淡水漁業(yè)》2017年01期
【摘要】:根據(jù)鯉皰疹病毒II型(Cyprinid herpesvirus Ⅱ,Cy HV-2)ORF 4基因序列(Gen Bank:JQ815364.1)設(shè)計特異性引物,PCR擴增得到ORF 4基因編碼框全長序列1 041 bp,將其克隆至原核表達載體p ET-32a(+)中,構(gòu)建了重組原核表達載體p ET-32a-ORF 4。將p ET-32a-ORF 4重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)得到融合表達的重組蛋白,融合表達的重組蛋白主要以包涵體的形式存在,其分子質(zhì)量約為57 ku,與預(yù)期大小一致。將純化的重組蛋白免疫日本大耳兔,制備了多克隆抗體,ELISA檢測抗體效價大于1∶50 000,Western blot檢測顯示該抗體可以特異性識別重組蛋白。間接免疫熒光檢測結(jié)果表明:該多克隆抗體可與由Cy HV-2感染引起細胞病變的異育銀鯽腦組織細胞(GICB)發(fā)生特異性的結(jié)合。
[Abstract]:According to the gene sequence of Cyprinid herpesvirus 鈪,
本文編號:1911073
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