發(fā)布時間：2018-05-17 20:05

  本文選題：四倍體小麥Langdon + 硒��； 參考：《麥類作物學(xué)報》2017年09期

【摘要】：硒是人類不可缺少的重要微量元素之一,人類必須補充足夠的硒才能保證身體健康。同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(homocysteine-S-methyltransferase,HMT)基因與植物富硒關(guān)鍵酶硒代半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(selenocysteine methyltransferase,SMT)基因同源。為了發(fā)掘并利用麥類作物中的富硒關(guān)鍵酶基因,基于NCBI已公布的節(jié)節(jié)麥(Aegilops tauschii Coss.)同型半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1基因(AetHMT1)的序列設(shè)計HMT1基因的特異性引物H1-F/H1-R,克隆四倍體小麥Langdon HMT1的開放閱讀框(open reading frame,ORF)后進行序列分析,并通過原核表達驗證該基因。結(jié)果表明,利用H1-F/H1-R從四倍體小麥Langdon(LDN)克隆出兩條長度均為975bp的序列,分別命名為LDNHMT1-1和LDNHMT1-2。LDNHMT1-1、LDNHMT1-2與AetHMT1基因一樣,均編碼342個氨基酸,分子量大小分別為35.19kDa和35.18kDa。通過氨基酸序列比對和進化樹分析發(fā)現(xiàn),LDNHMT1-1、LDNHMT1-2與其他HMT、SMT有較高的相似性。構(gòu)建原核表達載體,并通過SDS-PAGE鑒定,成功獲得LDNHMT1-1、LDNHMT1-2的原核表達菌株,且原核表達的蛋白質(zhì)與預(yù)測分子量大小一致。
[Abstract]:Selenium is one of the most important trace elements in human being. Homocysteine methyltransferase homocysteine-S-methyltransferase (HMT) gene is homologous to the selenocysteine methyltransferase (SMT) gene of plant selenocysteine methyltransferase. In order to explore and utilize selenium-rich key enzyme genes in wheat crops, Aegilops tauschii Coss.of NCBI has been published. The sequence of homocysteine methyltransferase 1 gene (AetHMT1) was designed as the specific primer of HMT1 gene H1-F / H1-R. the open reading frame of tetraploid wheat Langdon HMT1 was cloned and sequenced. The gene was confirmed by prokaryotic expression. The results showed that H1-F/H1-R was used to clone two 975bp sequences from tetraploid wheat Langdonn.It was named LDNHMT1-1 and LDNHMT1-2.LDNHMT1-1 LDNHMT1-2 encoded 342 amino acids, and their molecular weights were 35.19kDa and 35.18kDa, respectively. Amino acid sequence alignment and phylogenetic tree analysis showed that LDNHMT1-1 and LDNHMT1-2 were similar to other HMT-SMT. The prokaryotic expression vector was constructed and identified by SDS-PAGE. The prokaryotic expression strain of LDNHMT1-1 and LDNHMT1-2 was successfully obtained, and the prokaryotic expression protein was consistent with the predicted molecular weight.
【作者單位】： 中國科學(xué)院西北高原生物研究所;中國科學(xué)院大學(xué);青海省作物分子育種重點實驗室;四川農(nóng)業(yè)大學(xué)小麥研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31101140) 中國科學(xué)院戰(zhàn)略性A類先導(dǎo)科技專項子課題(XDA08030106);中國科學(xué)院西部之光一般項目 青海省重點研發(fā)與轉(zhuǎn)化計劃項目(2016-HZ-808) 青海省高原作物種質(zhì)資源創(chuàng)新與利用國家重點實驗室培育基地開放課題(2014-09)
【分類號】：S512.1

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本文編號：1902678