發(fā)布時間：2018-05-15 12:23

  本文選題：PIKCA基因 + AKT基因　； 參考：《西南農(nóng)業(yè)學報》2017年03期

【摘要】：PI3K與AKT組成的PI3K-AKT信號通路在細胞的增殖以及凋亡具有重要意義,本試驗旨在研究該信號通路在家兔SCs增殖過程中發(fā)揮的作用。采用siRNA介導的PIK3CA和AKT3基因進行基因的沉默表達。結果發(fā)現(xiàn)對處于對數(shù)生長期的細胞轉染si-PIK3CA-03或si-AKT3-01后48 h,分別對靶基因和上下游基因PTEN和Fox O1進行qRT-PCR反應,并采用CCK-8試劑盒通過酶標儀檢測其在轉染si-PIK3CA-03或si-AKT3-01后對細胞增殖能力的影響。結果表明:在轉染si-PIK3CA-03后,PIK3CA和AKT3基因的相對表達量均顯著下調(diào),PTEN和Fox O1基因的表達量均顯著上調(diào);當轉染了si-AKT3-01后,PTEN和FoxO1基因表達量均顯著上調(diào)。表明PTEN、Fox O1基因與PIK3CA、AKT3基因的相對表達量呈負相關。轉染實驗組OD值顯著低于空白對照組(P0.05),說明通過轉染實驗下調(diào)PIK3CA和AKT3基因表達后,細胞增殖能力均有顯著的下降。由此說明,分別抑制表達PIK3CA、AKT3基因后,靶基因的表達量顯著下降,家兔SCs的增殖能力也顯著下降,說明PIK3CA、AKT3基因能夠正向調(diào)控肌細胞的增殖。
[Abstract]:The PI3K-AKT signaling pathway composed of PI3K and AKT plays an important role in cell proliferation and apoptosis. The purpose of this study was to study the role of PI3K-AKT signaling pathway in the proliferation of rabbit SCs. PIK3CA and AKT3 genes mediated by siRNA were used for silencing expression. The results showed that 48 h after transfection of si-PIK3CA-03 or si-AKT3-01 into cells in logarithmic growth phase, qRT-PCR reaction was performed to target gene and upstream and downstream genes PTEN and Fox O1, respectively. The effect of si-PIK3CA-03 or si-AKT3-01 transfection on cell proliferation was detected by CCK-8 kit. The results showed that the relative expression of PIK3CA and AKT3 genes were significantly down-regulated after si-PIK3CA-03 transfection, and the expression of PTEN and Fox O1 genes were significantly up-regulated after si-AKT3-01 transfection. The results indicated that the expression of PTENV Fox O1 gene was negatively correlated with the relative expression of PIK3 CAG AKT3 gene. The OD value of the transfected group was significantly lower than that of the blank control group (P0.05), which indicated that after down-regulating the expression of PIK3CA and AKT3 genes, the proliferation ability of the transfected cells was significantly decreased. The results showed that after inhibiting the expression of PIK3CAAK _ 3 gene, the expression of target gene decreased significantly, and the proliferative ability of rabbit SCs decreased significantly, which indicated that PIK3CAAK _ 3 gene could positively regulate the proliferation of myocytes.
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學動物遺傳育種研究所;
【基金】：基金項目:國家兔產(chǎn)業(yè)技術體系建設(CARS-44-A-2)
【分類號】：S829.1

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本文編號：1892449