本文選題：鹿茸 + RNAi��； 參考：《生物技術(shù)通報》2016年08期

【摘要】：利用慢病毒介導(dǎo)的基因沉默體系,對梅花鹿生茸區(qū)骨膜干細胞(AP)中CGI99基因進行RNA干擾,并初步研究該基因?qū)毎鲋车挠绊�。設(shè)計出1條針對梅花鹿CGI99基因的shRNA序列與載體質(zhì)粒pLVTHM連接,之后與pSPAX2、pMD2.G質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK 293t細胞,獲得重組慢病毒,感染AP細胞;通過熒光定量PCR檢測CGI99基因的下調(diào)水平;通過MTT實驗檢測CGI99基因沉默對AP細胞增殖影響。基因的表達水平大幅度下調(diào),干擾效率達到70.8%;MTT實驗的數(shù)據(jù)曲線趨于一致。結(jié)果表明,成功構(gòu)建了針對梅花鹿CGI99基因的RNAi載體并干擾了CGI99基因在AP細胞中的表達,且初步確定CGI99基因?qū)P細胞的增殖并無顯著影響。
[Abstract]:Using lentivirus-mediated gene silencing system, the RNA interference of CGI99 gene in periosteum stem cells (APs) of sika deer was carried out, and the effect of the gene on cell proliferation was preliminarily studied. A shRNA sequence targeting sika deer CGI99 gene was designed and ligated with vector plasmid pLVTHM, then co-transfected with pSPAX2pMD2.G plasmid into HEK 293t cells to obtain recombinant lentivirus and infect AP cells, and the down-regulation level of CGI99 gene was detected by fluorescence quantitative PCR. The effect of CGI99 gene silencing on the proliferation of AP cells was detected by MTT assay. The level of gene expression was significantly down-regulated, and the interference efficiency reached 70.8%. The data curve of MTT assay tended to be consistent. The results showed that the RNAi vector targeting sika deer CGI99 gene was successfully constructed and interfered with the expression of CGI99 gene in AP cells, and it was preliminarily confirmed that CGI99 gene had no significant effect on the proliferation of AP cells.
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所特種經(jīng)濟動物分子生物學(xué)國家重點實驗室;
【基金】：吉林省科技發(fā)展計劃項目(20140204010YY) 吉林省自然科學(xué)基金項目(20140101139JC)
【分類號】：S825

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 路曉;孫紅梅;張偉;李春義;;以鹿茸為模型探索軟骨組織發(fā)生[J];中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報;2015年04期

2 韓慶功;鄭玉姝;;RNAi技術(shù)在抗甲型流感病毒中的研究進展[J];生物技術(shù)通報;2014年12期

3 郭倩倩;王大濤;褚文輝;魯曉萍;秦欣;趙海平;李春義;;利用慢病毒表達載體干擾梅花鹿角柄骨膜細胞P21基因[J];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2014年01期

4 張登祿;韓金祥;崔亞洲;周小艷;;胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因C14orf166的真核表達及其蛋白相互作用的蛋白質(zhì)組學(xué)篩選[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2010年03期

5 孫紅梅;李春義;楊福合;褚文輝;趙海平;魯小平;;鹿茸骨化機制的研究進展[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2009年15期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 宋家升;H5N1亞型禽流感病毒對家鴨致病力分子機制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2010年

2 郭靜會;胰腺癌血清蛋白質(zhì)指紋圖譜及CCR7與胰腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 路曉;孫紅梅;褚文輝;張偉;李春義;;梅花鹿CGI99基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建及其對鹿茸干細胞增殖的影響[J];生物技術(shù)通報;2016年08期

2 劉松嘯;張愛武;翟晶;黃杰;王光輝;鞠貴春;;精飼料補充料對生茸期梅花鹿營養(yǎng)物質(zhì)消化率及產(chǎn)茸性能的影響[J];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2016年02期

3 張偉;褚文輝;路曉;董振;王權(quán)威;李春義;;梅花鹿Thymosin beta 10基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建及其對鹿茸干細胞增殖的影響[J];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2016年01期

4 路曉;孫紅梅;張偉;李春義;;以鹿茸為模型探索軟骨組織發(fā)生[J];中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報;2015年04期

5 張愛武;翟晶;范敏;劉松嘯;付晶;鞠貴春;;雙陽梅花鹿初角茸、二杠茸中氨基酸組成及含量分析[J];經(jīng)濟動物學(xué)報;2015年04期

6 黃杰;張愛武;林偉欣;劉松嘯;翟晶;鞠貴春;;不同精料補充料對育成梅花鹿母鹿生產(chǎn)性能的影響[J];經(jīng)濟動物學(xué)報;2015年02期

7 楊春;劉振;路曉;李春義;;鹿茸干細胞MSAP分析技術(shù)體系的建立及引物篩選[J];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2015年04期

8 張恒;矯繼峰;黃金彪;趙金香;;塔里木馬鹿最佳收茸期探究[J];畜牧與獸醫(yī);2014年12期

9 趙金香;張恒;矯繼峰;陶大勇;;鹿茸Ca~(2+)含量與塔里木馬鹿收茸期的關(guān)系研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2014年18期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 管雪婷;野鳥源LPAIV、HPAIV對家鴨和野鴨的感染特性分析及AIV傳播方式的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2014年

【二級參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 趙辰;黃偉;梁熙;廖軍義;周年;胡寧;趙智;簡長春;;Smad7在Sox9增強BMP2成軟骨效應(yīng)中的作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2015年02期

2 李婷;李沐;孟星宇;劉寧;胡薇;;microRNA介導(dǎo)的IGF1基因沉默對鹿茸軟骨細胞增殖的影響[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2013年11期

3 張寶;黃克勇;郭勁松;吳嫻波;李凌;朱利;萬成松;趙衛(wèi);;H7N9病毒的來源和重組模式[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2013年07期

4 張宏偉;;H7N9禽流感的病毒特征及其對人類健康的潛在威脅[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2013年06期

5 楊帥;朱聞斐;舒躍龍;;豬流感病毒概述[J];病毒學(xué)報;2013年03期

6 范鳴;;Alnylam公司與葛蘭素史克公司合作應(yīng)用VaxiRNA技術(shù)提高疫苗生產(chǎn)能力[J];藥學(xué)進展;2012年05期

7 孫紅梅;楊福合;邢秀梅;劉琳玲;趙海平;李春義;;鹿茸再生干細胞成骨誘導(dǎo)(微粒體)培養(yǎng)體系的建立[J];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2010年06期

8 張國海;王啟釗;張景紅;許瑞安;;microRNA調(diào)控的靶向性病毒載體在基因治療中的應(yīng)用[J];生物工程學(xué)報;2010年06期

9 張登祿;韓金祥;崔亞洲;周小艷;;胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因C14orf166的真核表達及其蛋白相互作用的蛋白質(zhì)組學(xué)篩選[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2010年03期

10 張登祿;韓金祥;崔亞洲;周小艷;;C14orf166異位表達對Hela細胞增殖與遷移能力的影響[J];中華腫瘤防治雜志;2010年10期

，

本文編號：1855663