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水蕨中心體蛋白基因的克隆與原核表達

發(fā)布時間:2018-05-04 00:12

  本文選題:中心體蛋白 + 克隆 ; 參考:《西北植物學報》2016年03期


【摘要】:蕨類植物的精子形成是一個運動細胞器重新發(fā)生的過程,但對其精子發(fā)生的分子機制仍不甚了解。中心體蛋白(centrin)是定位于細胞中心體上的一種高度保守的鈣結(jié)合蛋白,被認為可能是最早參與運動細胞器發(fā)生的蛋白質(zhì)。克隆鑒定centrin蛋白為進一步分析蕨類精子發(fā)生的分子機制奠定基礎(chǔ)。該研究從蕨類模式植物水蕨(Ceratopteris thalictroides)中克隆到了水蕨centrin基因(CtCEN),其cDNA序列全長為1 077bp,結(jié)構(gòu)分析表明CtCEN基因?qū)儆贓F-hand超家族的centrin基因。Centrin的系統(tǒng)樹分析發(fā)現(xiàn),藻類、蕨類以及動物等具鞭毛游動精子的生物聚為一支,而被子植物聚為另一分支,表明centrin的功能可能與運動細胞器鞭毛發(fā)生有關(guān)。原核表達和Western blot分析表明,CtCEN基因表達的蛋白能與人源centrin抗體發(fā)生結(jié)合,這一結(jié)果證實克隆到了centrin基因。
[Abstract]:Spermatogenesis in ferns is a process of reoccurrence of motility organelles, but the molecular mechanism of spermatogenesis is still unknown. Centrosomal protein (CEP) is a highly conserved calcium-binding protein located on the centrosome of cells, which may be the earliest involved in the development of motor organelles. Cloning and identification of centrin protein lay a foundation for further analysis of the molecular mechanism of spermatogenesis in ferns. In this study, centrin gene CtCENN was cloned from the fern model plant Ceratopteris thalictroids. Its cDNA sequence was 1 077bp.The structural analysis showed that the CtCEN gene belongs to the EF-hand superfamily centrin gene .Centrin phylogenetic tree analysis found that algae. The spermatozoa with flagellum such as ferns and animals are clustered into one branch, while angiosperms form another branch, indicating that the function of centrin may be related to the development of the flagella of the motility organelles. Prokaryotic expression and Western blot analysis showed that the protein expressed by CtCEN gene could bind to human centrin antibody, which confirmed the cloning of centrin gene.
【作者單位】: 上海師范大學生命與環(huán)境科學學院;上海資源植物功能基因組學重點實驗室上海辰山植物園;
【基金】:上海市自然科學基金(13ZR1429700) 上海市科學技術(shù)委員會課題(14DZ2260400)
【分類號】:Q943.2

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本文編號:1840710

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