本文選題：單增李斯特菌 + 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶��； 參考：《食品科學(xué)》2017年02期

【摘要】：以Gen Bank中報(bào)道的單增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)野生型菌株EGDe的nox基因(Gen Bank ID:986631)為研究對象,探討在高等動(dòng)植物中普遍存在的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶在Lm中是否也可以介導(dǎo)產(chǎn)生活性氧(reactive oxygen species,ROS)。首先通過誘導(dǎo)nox基因在BL21中表達(dá)產(chǎn)生Nox蛋白,利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和Western blot鑒定該蛋白質(zhì)分子質(zhì)量;然后構(gòu)建過表達(dá)菌株EGDe-nox,測定ROS產(chǎn)生情況,并使用實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測nox基因的過表達(dá)對Lm毒力基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明,經(jīng)鑒定Nox蛋白分子質(zhì)量約為33 k D,過表達(dá)菌株EGDe-nox與對照組EGDe的ROS產(chǎn)生量相比并無多大變化,nox基因的過表達(dá)會(huì)導(dǎo)致與侵襲相關(guān)的基因act A、inlA和inlB以及毒力基因prfA的表達(dá)上調(diào)。由此推測,該Nox蛋白不能獨(dú)立主導(dǎo)ROS的產(chǎn)量,但其過表達(dá)卻可以增強(qiáng)毒力基因表達(dá)上調(diào)。本研究為繼續(xù)探討細(xì)菌中Nox的作用提供一定的參考依據(jù)。
[Abstract]:The nox gene, Gen ID986631, of wild-type Listeria monocytogenes strain EGDe, which was reported in Gen Bank, was used as the research object. To investigate whether nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase, which is common in higher plants and animals, can also mediate the production of reactive oxygen species (oxygen) in LM. Firstly, the nox gene was induced to express in BL21 to produce Nox protein, and the molecular weight of the protein was identified by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis and Western blot, and then the overexpression strain EGDe-nox was constructed to determine the production of ROS. The effect of overexpression of nox gene on the expression of Lm virulence gene was detected by real-time fluorescence quantification-polymerase chain reaction. The results show that The molecular weight of Nox protein was about 33kD, and the overexpression of ROS gene of EGDe-nox did not change much compared with that of control group EGDe. The overexpression of ROS gene resulted in the up-regulation of the expression of invasion-related genes act Agnin A and inlB and virulence gene prfA. It is inferred that the Nox protein can not independently dominate the production of ROS, but its overexpression can increase the expression of virulence gene. This study provides some references for further study on the role of Nox in bacteria.
【作者單位】： 上海理工大學(xué)醫(yī)療器械與食品學(xué)院;華中師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31371776)
【分類號】：R378;Q78

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 隋建新;林洪;曹立民;王靜雪;王光輝;;單增李斯特菌(Listeria monocytogens)雞卵黃抗體的制備及其抑菌活性研究[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2009年02期

2 田霞;李遠(yuǎn)釗;張培正;朱英蓮;;即食菜卷和肉湯中單增李斯特菌生長模型及控制研究[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2005年10期

3 王海艷;劉中學(xué);石新華;趙林立;劉虹;甄宏太;;單增李斯特菌及其表面蛋白的研究進(jìn)展[J];檢驗(yàn)檢疫科學(xué);2006年02期

4 郭明星;朱堂明;郭愛珍;陳晨;趙暉;王振華;陳建軍;徐新生;;湖北省水產(chǎn)品中單增李斯特菌基因分型研究[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2008年09期

5 梁啟平;陳健舜;陳巧妙;勞華均;黃紹棠;方維煥;;進(jìn)口水產(chǎn)品中單增李斯特菌的分子流行病學(xué)特點(diǎn)[J];微生物學(xué)報(bào);2009年06期

6 楊松;曲祖乙;劉永華;;單增李斯特菌定量檢測方法研究[J];中國農(nóng)學(xué)通報(bào);2012年23期

7 聞一鳴;李志清;童吉宇;向軍儉;;免疫磁珠富集技術(shù)聯(lián)合選擇性培養(yǎng)基快速檢測單增李斯特菌[J];生物工程學(xué)報(bào);2013年05期

8 于佳佳;鄧興梅;蔣建軍;朱江虹;馬勛;;單增李斯特菌新疆臨床分離株毒力基因的克隆和序列分析[J];石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2014年02期

9 陸海霞;黃小鳴;朱軍莉;;超高壓對單增李斯特菌細(xì)胞膜的損傷和致死機(jī)理[J];微生物學(xué)報(bào);2014年07期

10 葉正興;王艷;李培京;劉凱;葉長蕓;;單增李斯特菌1/2a血清型菌株生物膜形成能力及相關(guān)基因差異研究[J];中國人獸共患病學(xué)報(bào);2013年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 龍軼;周小明;邢達(dá);;基于磁珠分離和超分支滾環(huán)擴(kuò)增的單增李斯特菌電化學(xué)發(fā)光檢測[A];第七屆全國光生物學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2010年

2 丁建英;韓劍眾;;食品中單增李斯特菌的存在現(xiàn)狀及檢測方法研究進(jìn)展[A];中國食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會(huì)第五屆年會(huì)暨第四屆東西方食品業(yè)高層論壇論文摘要集[C];2007年

3 張耀祺;石磊;;分離自生肉的單增李斯特菌的血清型及脈沖場凝膠電泳分型研究[A];“亞運(yùn)食品安全與廣東食品產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新發(fā)展”學(xué)術(shù)研討會(huì)暨2009年廣東省食品學(xué)會(huì)年會(huì)論文集[C];2009年

4 陳慧燕;;單增李斯特菌室間比對活動(dòng)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果評價(jià)[A];2009年衛(wèi)生檢驗(yàn)新技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)刊[C];2009年

5 陳健舜;方維煥;;食品中單增李斯特菌的分子流行病學(xué)特征與致病力研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2009學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下冊）[C];2009年

6 鄭華英;江元山;呂均;熊燕;龍一兵;曾瑩春;;單增李斯特菌食品分離株多重PCR鑒定分型[A];2008年中國微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

7 何冬梅;王洪敏;柯昌文;鄧小玲;楊杏芬;賴蔚傮;柯碧霞;李柏生;譚海玲;;單增李斯特菌檢測基因芯片的研制與評價(jià)[A];2011廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2011年

8 斯國靜;俞驊;劉濤;胡俊;;單核細(xì)胞增生李斯特菌在市售食品中污染現(xiàn)狀分析[A];2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)病毒學(xué)分會(huì)、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

9 郭明星;朱堂明;陳晨;趙暉;王振華;陳建軍;徐新生;;湖北省水產(chǎn)品中單增李斯特菌基因分型研究[A];第二屆全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

10 程超男;張笑言;彭媛;白家磊;劉原媛;寧保安;高志賢;;基于3-巰基丙酸修飾金電極構(gòu)建電化學(xué)免疫傳感器檢測牛奶中的單增李斯特菌[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第三十三屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前8條

1 ;重視單增李斯特菌風(fēng)險(xiǎn)防范[N];中國醫(yī)藥報(bào);2014年

2 張啟華邋姜文輝;煙臺首次從進(jìn)口水產(chǎn)品中檢出單增李斯特菌[N];中國國門時(shí)報(bào);2007年

3 記者　 胡其峰;進(jìn)口日本食品連續(xù)出現(xiàn)質(zhì)量問題[N];光明日報(bào);2006年

4 黃全權(quán);進(jìn)口日本食品連出問題,質(zhì)檢交涉[N];新華每日電訊;2006年

5 夏文俊;進(jìn)口日本食品連續(xù)出現(xiàn)質(zhì)量問題[N];中國質(zhì)量報(bào);2006年

6 呂壯;日本輸華食品頻現(xiàn)安全問題[N];中華工商時(shí)報(bào);2006年

7 高亞蘭;小心：進(jìn)口日本食品頻現(xiàn)質(zhì)量問題[N];國際商報(bào);2006年

8 記者　黃全權(quán);進(jìn)口日本食品連續(xù)出現(xiàn)問題[N];人民日報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 方春;單核細(xì)胞增生李斯特菌譜系Ⅲ強(qiáng)毒株與弱毒菌株比較基因組及致病力差異機(jī)制[D];浙江大學(xué);2015年

2 亢春雨;食源性單核增生性李斯特氏菌的分布、遺傳多態(tài)性及其毒理機(jī)制研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 張一敏;三種有機(jī)酸對單增李斯特菌誘導(dǎo)性耐酸響應(yīng)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 李長城;三文魚魚籽中單增李斯特菌預(yù)測模型建立及控制研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

5 夏葉;單核細(xì)胞增生李斯特菌：應(yīng)激轉(zhuǎn)錄組學(xué)與RsbX對SigB表達(dá)和細(xì)菌存活的調(diào)控[D];浙江大學(xué);2015年

6 郗遠(yuǎn);植物提取物對單增李斯特菌的抑制作用及乳化香腸的品質(zhì)影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 王建鋒;抗單核細(xì)胞增多性李斯特菌溶血素化合物的發(fā)現(xiàn)及作用機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2015年

8 隋建新;單增李斯特菌雞卵黃抗體的抑菌性能及其機(jī)理研究[D];中國海洋大學(xué);2010年

9 田靜;熟肉制品中單增李斯特菌的風(fēng)險(xiǎn)評估及風(fēng)險(xiǎn)管理措施的研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2010年

10 張輝;單增李斯特菌ActA的表達(dá)、免疫原性及膠體金試紙研制[D];吉林大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馮曉慧;單增李斯特菌在肉牛屠宰過程中的流行特點(diǎn)及其熱失活模型的建立[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 于旖斯;食品中單增李斯特菌的分離、鑒定及抑制研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2010年

3 趙一鳴;三種分型技術(shù)對食源性單增李斯特菌分型研究[D];華南理工大學(xué);2015年

4 萬松華;食品中污染微生物通用型熒光PCR檢測方法研究[D];華南理工大學(xué);2015年

5 周陽;食品中單增李斯特菌快速檢測方法的建立與應(yīng)用[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 王昊宇;食品中單增李斯特菌的分離鑒定及PCR快速檢測方法的研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2013年

7 周旋;姜黃素抑制單增李斯特菌溶血素活性的分子機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2016年

8 張星星;漆黃素對單增李斯特菌感染妊娠小鼠流產(chǎn)的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2016年

9 解新方;單增李斯特菌表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測技術(shù)研究[D];天津科技大學(xué);2015年

10 李云霞;納米磁珠對單增李斯特菌低場磁共振檢測的影響研究[D];上海師范大學(xué);2016年

，

本文編號：1836636