本文選題：播娘蒿 + DsKIN��； 參考：《應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)》2017年03期

【摘要】：播娘蒿是極端耐寒的冷誘導(dǎo)植物,研究其低溫脅迫下的冷響應(yīng)基因?qū)τ诮沂酒淇购跃哂兄匾饬x.根據(jù)擬南芥At KIN1和At KIN2同源比對(duì),設(shè)計(jì)同源引物進(jìn)行播娘蒿KIN基因克隆,通過(guò)RACE技術(shù)克隆得到Ds KIN1基因,利用Vector NTI11.5軟件對(duì)其進(jìn)行序列分析,采用Realtime-PCR測(cè)定Ds CBF1、Ds CBF2、Ds COR和Ds KIN1基因在不同處理方式[整株低溫處理、同一植株局部低溫處理和局部未受低溫處理(兩部分植株)]下各時(shí)間段(0.2 h、0.5 h、1 h、2 h、6 h、12 h、24 h)的表達(dá),采用String數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)分析與Ds KIN1相互作用的蛋白.結(jié)果顯示,Ds KIN1基因序列全長(zhǎng)為462 bp,開(kāi)放閱讀框ORF長(zhǎng)度為198 bp,編碼66個(gè)氨基酸,分子量(Mr)為6.61×10~3,理論等電點(diǎn)為9.10,親水性好.播娘蒿Ds CBF1和Ds CBF2在0.2 h開(kāi)始表達(dá),在2 h達(dá)到最大,隨后下降.在冷誘導(dǎo)0.2 h后,Ds CBF調(diào)控的耐寒基因Ds COR和Ds KIN1基因開(kāi)始表達(dá),均呈現(xiàn)上調(diào)的趨勢(shì).整株、局部冷誘導(dǎo)植株與同一植株上未受低溫脅迫部位的耐寒基因Ds COR和Ds KIN1表達(dá)模式類(lèi)似.此外發(fā)現(xiàn)與Ds KIN1相互作用的蛋白大部分為低溫誘導(dǎo)蛋白、鹽和滲透壓脅迫響應(yīng)的信號(hào)蛋白、與滲透調(diào)節(jié)有關(guān)的家族蛋白、RING-H2鋅指蛋白2B以及未知蛋白等.本研究說(shuō)明播娘蒿局部冷誘導(dǎo)時(shí),冷信號(hào)可進(jìn)行傳遞,使未受冷誘導(dǎo)部位獲得耐寒性能.
[Abstract]:Artemisia vulgaris is an extremely cold-tolerant cold-induced plant. It is important to study its cold-response gene under low temperature stress for revealing its cold resistance. According to the homologous comparison of at KIN1 and at KIN2 in Arabidopsis thaliana, homologous primers were designed to clone KIN gene of Artemisia vulgaris. Ds KIN1 gene was cloned by RACE technique and sequenced by Vector NTI11.5 software. Realtime-PCR was used to detect the expression of COR and Ds KIN1 genes in different treatments (whole low temperature treatment, local low temperature treatment and local non-cryogenic treatment (two parts of plants), and the expression of COR and Ds KIN1 gene in different treatments (0. 2 h ~ 0. 5 h ~ 1 h ~ 2 h ~ 6 h ~ (12) h ~ (24 h) in different treatments (whole plant low temperature treatment, same plant local low temperature treatment and local low temperature treatment (two parts plants). The proteins interacting with Ds KIN1 were predicted by String database. The results showed that the length of KIN1 gene was 462 BP, the length of open reading frame ORF was 198 BP, the molecular weight was 6.61 脳 10 ~ (-3), the theoretical isoelectric point was 9.10, and the hydrophilicity was good. The expression of Ds CBF1 and Ds CBF2 began at 0. 2 h, reached the maximum at 2 h, and then decreased. After 0. 2 h of cold induction, Ds COR and Ds KIN1 genes regulated by Ds CBF began to express, both of which were up-regulated. The expression patterns of Ds COR and Ds KIN1 were similar in whole and local cold induced plants. In addition, it was found that most of the proteins interacting with Ds KIN1 were hypothermia inducible proteins, signal proteins responsive to salt and osmotic stress, RING-H2 zinc finger proteins 2B and unknown proteins related to osmotic regulation. This study shows that the cold signal can be transmitted during local cold induction, so that the cold tolerance can be obtained.
【作者單位】： 四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 微生物與代謝工程四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31171447) “十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2014BAD02B02) 國(guó)家微生物資源平臺(tái)項(xiàng)目(NIMR-2016-8) 四川省科技廳項(xiàng)目(2014GZX0005,2017JCPT0001)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：Q943.2

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本文編號(hào)：1828695