miR-194-5p靶向調(diào)控BCKDHA基因的表達(dá)
本文選題:miR--p + BCKDHA基因; 參考:《畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年08期
【摘要】:旨在預(yù)測(cè)并驗(yàn)證調(diào)控支鏈氨基酸分解代謝的限速酶支鏈α-酮酸脫氫酶復(fù)合體(Branched-chainα-ketoacid dehydrogenase complex,BCKDH)中α亞基即BCKDHA基因表達(dá)的關(guān)鍵miRNA。本研究利用3個(gè)在線軟件預(yù)測(cè)與該基因具有靶標(biāo)關(guān)系的miRNAs。利用熒光定量PCR檢測(cè)小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中和超表達(dá)后關(guān)鍵miRNA與BCKDHA的表達(dá)量。結(jié)果表明,miR-194-5p是調(diào)控BCKDHA表達(dá)的一個(gè)關(guān)鍵miRNA,其種子序列與BCKDHA3′UTR第190~196位堿基完全互補(bǔ)。MiR-194-5p的表達(dá)隨分化時(shí)間呈下降趨勢(shì),而BCKDHA mRNA則呈上升趨勢(shì)。雙熒光素酶報(bào)告結(jié)果也顯示二者具有靶標(biāo)關(guān)系,miR-194-5p下調(diào)BCKDHA的表達(dá)。超表達(dá)miR-194-5p后,BCKDHA的表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05)。由此證明,miR-194-5p通過與BCKDHA基因3′UTR結(jié)合抑制其表達(dá)。
[Abstract]:The aim of this study was to predict and verify the expression of BCKDHA gene in the 偽 -ketoacid dehydrogenase complex Branched-chain 偽 -ketoacid dehydrogenase complex (Branched-chain 偽 -ketoacid complex), a rate-limiting enzyme that regulates the catabolism of branched chain amino acids. In this study, three online software were used to predict the targeted miRNAs. Fluorescence quantitative PCR was used to detect the expression of key miRNA and BCKDHA during and after the differentiation of mouse 3T3-L1 preadipocytes. The results showed that miR-194-5p was a key miRNAs regulating the expression of BCKDHA, and its seed sequence was complementary to the 190,196th base of BCKDHA3'UTR. The expression of MiR-194-5p decreased with the differentiation time, while BCKDHA mRNA showed an increasing trend. The results of double luciferase report also showed that the expression of BCKDHA was down-regulated by miR-194-5p. After overexpression of miR-194-5p, the expression of BCKDHA was significantly down-regulated (P 0.05). It is suggested that miR-194-5p inhibits its expression by binding to BCKDHA gene 3'UTR.
【作者單位】: 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;左云縣畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31372292)
【分類號(hào)】:Q78
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1827671
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