本文選題：大豆 + 煙草　； 參考：《大豆科學(xué)》2017年05期

【摘要】：大豆易遭受干旱、鹽、低溫等非生物脅迫,嚴(yán)重導(dǎo)致產(chǎn)量下降。利用分子生物學(xué)技術(shù)提高作物抗性是作物育種的有效途徑。鋅指蛋白是植物中常見的重要轉(zhuǎn)錄因子,能夠調(diào)控多種脅迫誘導(dǎo)基因的表達(dá),有效提高綜合抗性。在這項(xiàng)研究中,利用RT-PCR方法克隆大豆(Glycine max L.)GmWRKY35基因。其cDNA為1 500 bp,編碼一個(gè)499個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì),預(yù)測(cè)其分子量為54.89 kD,等電點(diǎn)(p I)為6.74。亞細(xì)胞定位分析表明,GmWRKY35定位于細(xì)胞核。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析顯示,GmWRKY35轉(zhuǎn)錄能被干旱誘導(dǎo)。把GmWRKY35基因通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化煙草(Nicotiana tabacum L.)中。在干旱脅迫下,與野生型煙草相比,轉(zhuǎn)基因煙草植株表現(xiàn)出主根較長(zhǎng),葉子萎焉少,POD和SOD活性較高,MDA含量和電解質(zhì)滲漏率較少。主要功能驗(yàn)證表明,GmWRKY35基因在煙草中表達(dá)增強(qiáng)了干旱脅迫耐受性。這項(xiàng)研究表明大豆RING-H2型鋅指蛋白在植物逆境中有重要作用,同時(shí)也為大豆抗性育種提供一個(gè)優(yōu)良的候選基因。
[Abstract]:Soybean is vulnerable to drought, salt, low temperature and other abiotic stresses, which seriously lead to the decline of yield. It is an effective way to improve crop resistance by using molecular biology technology. Zinc finger protein is an important transcription factor in plants, which can regulate the expression of various stress-induced genes and effectively enhance the comprehensive resistance. In this study, the Glycine max L.)GmWRKY35 gene was cloned by RT-PCR method. Its cDNA is 1 500bp, which encodes a 499-amino acid protein. The predicted molecular weight is 54.89kD and the isoelectric point I) is 6.74. Subcellular localization analysis showed that GmWRKY35 was located in the nucleus. Real-time fluorescence quantitative PCR analysis showed that GmWRKY35 transcription could be induced by drought. Transformation of GmWRKY35 Gene into Nicotiana tabacum L. by Agrobacterium tumefaciens In. Under drought stress, transgenic tobacco plants showed longer main roots, higher POD and SOD activities and less electrolyte leakage. The main function test showed that the expression of GmWRKY35 gene in tobacco enhanced tolerance to drought stress. This study indicates that RING-H2 zinc finger protein plays an important role in plant stress and provides a good candidate gene for soybean resistance breeding.
【作者單位】： 黃淮學(xué)院生物與食品工程學(xué)院;
【基金】：河南省科技發(fā)展計(jì)劃(112300410042)
【分類號(hào)】：S565.1

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本文編號(hào)：1818165