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篩選TXNDC5與胰島素相關(guān)信號(hào)通路關(guān)鍵基因的探討

發(fā)布時(shí)間:2018-04-27 15:12

  本文選題:硫氧還蛋白 + 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白。 參考:《山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年03期


【摘要】:目的旨在探討硫氧還蛋白5(TXNDC5)是否通過胰島素抵抗或胰島素信號(hào)通路參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)發(fā)病過程。方法分離培養(yǎng)RA滑膜細(xì)胞(RASFs),用小干擾RNA抑制其TXNDC5的表達(dá),提取各樣本總RNA組成樣本池,采用胰島素抵抗PCR Array和胰島素信號(hào)通路PCR Array檢測(cè)相關(guān)基因的表達(dá),采用RT-PCR法和ELISA法分別檢測(cè)相關(guān)基因mRNA和蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果 RASFs中TXNDC5表達(dá)被抑制后,PCR Array檢測(cè)IGF-1、PCK1、SLC2A4、IL1R1和胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)的表達(dá)明顯發(fā)生變化。經(jīng)驗(yàn)證,IGFBP1在mRNA和蛋白水平均顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.001);而IGF-1、PCK1、SLC2A4和IL1R1的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.792 7,P=0.713 0,P=0.452 9,P=0.354 2)。胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)在RASFs中的表達(dá)無明顯變化(P=0.511 5)。結(jié)論在RASFs中,TXNDC5可能通過抑制胰島素信號(hào)通路IGFBP1表達(dá)參與RA病變過程。
[Abstract]:Objective to investigate whether thioredoxin 5 (TXNDC5) participates in the pathogenesis of rheumatoid arthritis (RA) through insulin resistance or insulin signaling pathway. Methods RA synovial cells were isolated and cultured. The expression of TXNDC5 was inhibited by small interfering RNA. The total RNA of each sample was extracted to form a sample pool. Insulin resistance PCR Array and insulin signal pathway PCR Array were used to detect the expression of related genes. The expression of mRNA and protein were detected by RT-PCR and ELISA, respectively. Results after the expression of TXNDC5 was inhibited in RASFs, the expression of IGF-1 and IGFBP1 were detected by PCR Array. The expression of IGF-1, SLC2A4, IL-1R1 and insulin-like growth factor binding protein 1 (IGFBP1) were detected by Array. The expression of IGFBP1 in mRNA and protein was significantly higher than that in control group (P < 0. 001), but there was no significant difference in the expression of IGF-1, PCK1, SLC2A4 and IL1R1 (P 0. 792 7, P 0. 713 0, P 0. 452 9, P 0. 354 2). The expression of insulin-like growth factor binding protein (IGFBP3) in RASFs was not significantly changed. Conclusion TXNDC5 may be involved in the pathogenesis of RA by inhibiting the expression of IGFBP1 in insulin signaling pathway in RASFs.
【作者單位】: 山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院;山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院醫(yī)學(xué)研究中心;山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院骨科;山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】:山東省自然科學(xué)基金(ZR2014HP018) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計(jì)劃(2013WS0131)
【分類號(hào)】:R363

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1811230

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