本文關(guān)鍵詞：導(dǎo)入TaNHX2基因提高了轉(zhuǎn)基因普那菊苣的耐鹽性，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

第31卷第18期2011年9月

生態(tài)學(xué)報ACTAECOLOGICASINICA

Vol．31，No．18Sep．，2011

2011，31（18）：5264-5272．張麗君，程林梅，杜建中，郝曜山，王亦學(xué)，李貴全，孫毅．導(dǎo)入TaNHX2基因提高了轉(zhuǎn)基因普那菊苣的耐鹽性．生態(tài)學(xué)報，

ChengLM，DuJZ，HaoYS，WangYX，LiGQ，SunY．IntroductionofTaNHX2geneenhancedsalttoleranceoftransgenicpunachicoryZhangLJ，

plants．ActaEcologicaSinica，2011，31（18）：5264-5272．

導(dǎo)入TaNHX2基因提高了轉(zhuǎn)基因普那菊苣的耐鹽性

1，222221，*張麗君，程林梅，杜建中，郝曜山，王亦學(xué)，李貴全，孫

（1．山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，太谷030081；2．山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究中心，太原030031）

毅

1，2，*

摘要：我國部分地區(qū)土地鹽堿化的日益嚴重，對作物的生長和生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生了顯著影響，因此通過植物基因工程手段培育耐鹽堿的轉(zhuǎn)基因作物品種對改善作物的生存能力和生態(tài)環(huán)境，，提高作物產(chǎn)量具有重要的意義。采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將來自小麥（TriticumaestivumLinn）的Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運蛋白的基因（vacuolarNa+/H+exchangerorantiporter，NHE或NHA），簡稱NHX、對普那菊苣（CichoriumintybusL．cv．Puna）植株進行了遺傳轉(zhuǎn)化。經(jīng)抗生素篩選以及針對TaNHX2基因的PCR檢測和Southern雜交分析，證明獲得了28株轉(zhuǎn)TaNHX2基因的普那菊苣植株。用不同濃度NaCl溶液對普那菊苣野生型和T0代種子、愈傷組織和結(jié)果表明：轉(zhuǎn)TaNHX2基因普那菊苣植株表現(xiàn)出一定的抗性，比野生型明顯提高。在300mmol/L幼苗生長情況脅迫的研究，

NaCl脅迫下轉(zhuǎn)基因植株種子的出芽率、外植體出愈率和分化率是野生型植株的2—4倍，而500mmol/LNaCl濃度為野生型和或幼苗不能正常生根、或已生根幼苗不能轉(zhuǎn)基因外植體能否生長的臨界點。在此臨界值下野生型外植體或不能形成愈傷組織、

正常成長，而轉(zhuǎn)基因外植體可以繼續(xù)形成愈傷組織并正常生根生長。同時對500mmol/LNaCl脅迫下野生型和轉(zhuǎn)基因普那菊苣幼苗其體內(nèi)丙二醛含量（MDA）、過氧化氫酶（POD）和超氧化物歧化酶（SOD）活性進行測定，結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因植株比野生型POD活性提高了1—3倍，SOD活性提高了2—3倍，植株的MDA含量降低了1—3倍，分析發(fā)現(xiàn)普那菊苣的耐鹽性與其體內(nèi)的過氧化氫酶（POD）和超氧化物歧化酶（SOD）活性密切相關(guān)。丙二醛含量（MDA）、

關(guān)鍵詞：普那菊苣；TaNHX2；轉(zhuǎn)基因；耐鹽性

IntroductionofTaNHX2geneenhancedsalttoleranceoftransgenicpunachicoryplants

2*2，*

ZHANGLijun1，，CHENGLinmei2，DUJianzhong2，HAOYaoshan2，WANGYixue2，LIGuiquan1，，SUNYi1，

1ShanxiArgricultureUniversityTaigu030081，China

2BiotechnologyResearchCenter，ShanxiAcademyofAgriculturalSciencesTaiyuan030031，China

Abstract：ThegrowingseverityoflandsalinizationandalkalizationinsomeareasofChinahasresultedinadverseimpactsoncropproductionandagriculture-ecologicalenvironment．Soilsalinityisoneofthemajorlimitingfactorsaffectingcropgrowth，developmentandyieldinaridandsemiaridregionsofChina．Therefore，breedingforsalineandalkalinetolerantcropvarietiesthroughgeneticengineeringapproachesisofgreatsignificanceforimprovingthecropsurvivabilityinsalineandalkalineconditionsandecologicalenvironment，aswellasforenhancingcropproduction．Withthedevelopmentofmolecularbiologyandgenetictransformationtechnology，numerousgenesrelatedtosalineandalkalinetoleranceshavebeenfoundandcloned．Introductionofthesegenesintovariousplantshasachievedrapidimprovementoftheirtolerancessalineandalkalineconditions．CichoriumintybusL．cv．Puna．belongingtoAsteraceaefamilyiscommonlyknownaswitloofcichoryandwidelydistributedinnorthern，andcentralChina．Inthisstudy，awheat（TriticumaestivumLinn）vacuolarNa+/H+exchangergene（TaNHX2），inconnectionwithplantsalttolerance，wasintroducedintopunachicoryusingAgrobacterium-mediatedtransformationapproach．Punachicoryleafsegmentswerepreculturedfor2—3daysbeforebeing

基金項目：國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項（2009ZX08003-017B）；山西省農(nóng)科院攻關(guān)項目（Ygg0912）收稿日期：2011-03-30；

修訂日期：2011-07-11

*通訊作者Correspondingauthor．E-mail：li-gui-quan@126．com；sunyi692003@yahoo．com．cn

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