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豌豆終止子rbc-T在轉(zhuǎn)基因小麥研究中的應(yīng)用

發(fā)布時間:2018-04-20 18:41

  本文選題:胭脂堿合酶終止子(nos-T) + 豌豆終止子(rbc-T); 參考:《作物學(xué)報》2017年08期


【摘要】:目前常用的轉(zhuǎn)基因載體元件大多為真菌或細菌來源,引發(fā)對轉(zhuǎn)基因食品安全性的擔(dān)憂。本研究克隆了豌豆終止子rbc-T,并用其替換農(nóng)桿菌終止子nos-T構(gòu)建轉(zhuǎn)化載體,利用基因槍法將攜帶Ubi啟動子、GUS基因和終止子rbc-T組成的最小表達框片段轉(zhuǎn)化普通小麥,同時以帶有nos-T終止子的載體為對照,經(jīng)過PCR檢測篩選獲得T2代穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因小麥株系。GUS組織化學(xué)染色及酶活定量分析結(jié)果表明,帶有nos-T及rbc-T的轉(zhuǎn)基因小麥中均能檢測到GUS基因不同程度的表達。因此認為,豌豆終止子rbc-T可以代替農(nóng)桿菌終止子nos-T用于小麥的轉(zhuǎn)基因研究。
[Abstract]:Most of the commonly used transgenic vector components are fungi or bacteria, causing concerns about the safety of GM food. In this study, the pea Terminator rbc-Twas cloned, and the transformation vector was constructed by replacing Agrobacterium tumefaciens Terminator nos-T. The minimal expression frame fragment consisting of Ubi promoter Gus gene and Terminator rbc-T was transformed into common wheat by gene gun method. At the same time, using the vector with nos-T Terminator as control, the transgenic wheat lines. Gus histochemical staining and quantitative analysis of enzyme activity were obtained by PCR screening. The expression of GUS gene was detected in transgenic wheat with nos-T and rbc-T. Therefore, the pea Terminator rbc-T can replace Agrobacterium tumefaciens Terminator nos-T for wheat transgenic research.
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)學(xué)院/旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國家重點實驗室;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所/農(nóng)作物基因資源與基因改良國家重大科學(xué)工程/農(nóng)業(yè)部麥類生物學(xué)與作物遺傳育種重點實驗室;
【基金】:國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(2014ZX08002-003B,2016ZX08002002,2016ZX08002005)資助~~
【分類號】:S512.1

【參考文獻】

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本文編號:1778970

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