本文選題：大豆 + phyA基因��； 參考：《作物學(xué)報(bào)》2016年12期

【摘要】：植酸是植物源食品中的主要抗?fàn)I養(yǎng)成分,降低植酸含量可有效提高大豆的營(yíng)養(yǎng)利用率。本文根據(jù)大豆密碼子使用偏好性,對(duì)無(wú)花果曲霉植酸酶phyA基因進(jìn)行密碼子優(yōu)化,人工合成了適合在大豆中表達(dá)的phyA(b)基因。以p CAMBIA3301為骨架,構(gòu)建由大豆凝集素基因啟動(dòng)子和信號(hào)肽序列調(diào)控的植物表達(dá)載體pCBPS-phyA(b)。用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法遺傳轉(zhuǎn)化吉林35大豆子葉節(jié)。PCR檢測(cè)表明目的基因已初步整合至大豆基因組中;bar試紙條表明所有陽(yáng)性植株中均能檢測(cè)到bar基因的蛋白產(chǎn)物;除草劑葉片涂抹顯示野生型的葉片出現(xiàn)黃化或枯萎現(xiàn)象,而轉(zhuǎn)基因植株葉片表現(xiàn)正常,具除草劑抗性;以半定量RT-PCR共篩選到13株轉(zhuǎn)phyA和19株轉(zhuǎn)phyA(b)陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因大豆植株。通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)基因大豆T_3種子中植酸酶活性、無(wú)機(jī)磷和植酸磷含量等檢測(cè),證明人工基因phyA(b)比phyA在大豆種子中所表達(dá)的植酸酶具有更高的活性,說(shuō)明密碼子優(yōu)化有利于提高外源基因的表達(dá)。
[Abstract]:Phytic acid in plant derived foods is the main anti nutrients, reduce the content of phytic acid can effectively improve the utilization rate of soybean nutrition. According to the soybean codon preference, codon optimization of Aspergillus ficuum phytase phyA gene was synthesized, suitable for up to phyA in Soybean (b) gene in P CAMBIA3301. Skeleton, expression vector pCBPS-phyA was constructed by soybean lectin gene promoter and signal peptide sequence control plants (b). By the method of genetic transformation of Soybean Cotyledonary Node of Jilin 35.PCR detection indicated that the target gene has been integrated into the soybean genome by Agrobacterium tumefaciens; bar assay showed that all positive plants were protein product of bar gene the detected; herbicide leaf painting shows the wild type leaves appeared chlorosis or wilting, and the leaves of transgenic plants showed normal with herbicide resistance were screened by semi quantitative RT-PCR; 13 strains of phyA and 19 strains of phyA (b) positive transgenic soybean plants. The activity of phytase transgenic soybean seed T_3, detection of inorganic phosphorus and phytate phosphorus content, it is shown that the artificial phyA gene (b) has higher activity than the phyA expression in the soybean seeds phytase that codon optimization to improve the expression of exogenous gene.

【作者單位】： 天津大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院;
【基金】：國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(2014ZX0800404B)資助~~
【分類號(hào)】：S565.1;Q943.2

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2 趙q

本文編號(hào)：1760217