發(fā)布時間：2018-04-16 01:11

  本文選題：短短芽胞桿菌 + 超氧化物歧化酶�。� 參考：《熱帶作物學報》2017年08期

【摘要】：短短芽胞桿菌FJAT-0809-GLX具有抑菌、抗褐變和保鮮功能。以短短芽胞桿菌菌株FJAT-0809-GLX總DNA為模板,采用PCR擴增超氧化物歧化酶(Supseroxide dismutase,SOD)基因,將該片段純化回收后與p MD18-T連接并轉(zhuǎn)入大腸桿菌(Escherichia coli)DH5α,進行序列測定,結果顯示SOD基因序列長度為609 bp(Gen Bank登錄號:KM255665),編碼202個氨基酸殘基。將SOD基因片段與同樣酶切的表達載體p ET-28a連接,構建重組表達載體p ET-28a-SOD,轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL-21,采用異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)進行誘導表達。SDS-PAGE結果表明,在菌體中存在約25 ku的蛋白表達產(chǎn)物,與該基因ORF預期大小接近。以上結果為進一步研究該酶的生理生化特性奠定了基礎。
[Abstract]:Short bacillus FJAT-0809-GLX has the function of inhibiting bacteria, resisting browning and keeping fresh.The superoxide dismutase dismutase (SOD) gene was amplified by PCR using the total DNA of Bacillus FJAT-0809-GLX strain as template. The fragment was purified and recovered and ligated with p MD18-T and transferred into Escherichia coli coli)DH5 偽, and sequenced.The results showed that the length of SOD gene was 609 bp(Gen Bank accession number: KM255665, encoding 202 amino acid residues.The recombinant expression vector pET-28a-SOD was constructed by ligating the SOD gene fragment with the same enzyme digested expression vector p ET-28a. The recombinant expression vector pET-28a-SOD was transformed into E. coli BL-21 and induced by Isopropyl- 尾 -D-thiogalactopyranoside side SOD. The results showed that the expression of pET-28a-SOD was induced by Isopropyl- 尾 -thiogalactopyranoside SOD.There were about 25 ku protein expression products in the cell, which was close to the expected size of the ORF of the gene.These results lay a foundation for the further study of the physiological and biochemical characteristics of the enzyme.
【作者單位】： 福建省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)生物資源研究所;
【基金】：福建省自然基金項目(No.2014J06012) 農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(No.201303094) 福建省農(nóng)業(yè)科學院青年英才計劃項目(No.YC2015-7)
【分類號】：Q78;Q936

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本文編號：1756630