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陸地棉GhVP1基因干擾載體的構(gòu)建及擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化

發(fā)布時(shí)間:2018-04-10 05:07

  本文選題:GhVP基因 切入點(diǎn):RNA干擾 出處:《分子植物育種》2017年07期


【摘要】:為進(jìn)一步探索陸地棉GhVP1基因的功能,本研究以本實(shí)驗(yàn)室克隆得到的陸地棉GhVP1基因?yàn)槟0?經(jīng)Blast比對(duì),選擇長度為347 bp片段作為干涉載體正義、反義序列。利用In-fusion方法構(gòu)建干涉載體,挑選陽性克隆測序驗(yàn)證,成功構(gòu)建pBI121-PH::VP1干涉載體。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化擬南芥,并進(jìn)行PCR檢測,成功獲得9株轉(zhuǎn)基因苗,并對(duì)獲得的T3代轉(zhuǎn)基因擬南芥進(jìn)行耐鹽性分析。結(jié)果顯示,鹽脅迫下,轉(zhuǎn)干涉載體擬南芥的發(fā)芽率降低,根長變短,整個(gè)生育期的生長受到抑制。研究表明VP基因與植物的耐鹽性相關(guān),為進(jìn)一步研究GhVP1基因及其作用機(jī)理提供了參考依據(jù)。
[Abstract]:In order to further explore the function of GhVP1 gene in upland cotton, the GhVP1 gene of Upland cotton was cloned in our laboratory as template. The length of 347bp fragment was selected as the sense vector and antisense sequence by Blast comparison.The interference vector was constructed by In-fusion method, and the pBI121-PH::VP1 interference vector was successfully constructed by selecting positive clones and sequencing.Nine transgenic plants were successfully obtained by Agrobacterium tumefaciens mediated transformation of Arabidopsis thaliana and detected by PCR, and salt tolerance of T3 generation transgenic Arabidopsis thaliana was analyzed.The results showed that under salt stress, the germination rate of Arabidopsis thaliana was decreased, the root length was shortened, and the growth of Arabidopsis thaliana during the whole growth period was inhibited.The results showed that VP gene was related to salt tolerance of plants, which provided a reference for further study on GhVP1 gene and its mechanism.
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所棉花生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室農(nóng)業(yè)部棉花遺傳改良重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:河南省基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃項(xiàng)目(142300413232)資助
【分類號(hào)】:Q943.2;S562

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1729772

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