本文選題：Bmintegrin　切入點(diǎn)：β　出處：《生物工程學(xué)報(bào)》2017年12期

【摘要】：整合素作為一種跨膜糖蛋白,與生物體的生理和病理等多個(gè)過(guò)程密切相關(guān)。為了探究其在家蠶中扮演的角色,通過(guò)PCR及RACE技術(shù)克隆得到了家蠶整合素β家族成員Bmintegrinβ1,通過(guò)結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)網(wǎng)站對(duì)其結(jié)構(gòu)域進(jìn)行了預(yù)測(cè),并構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)對(duì)其進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行分析,此外通過(guò)原核表達(dá)系統(tǒng)及蛋白純化方法獲得其重組蛋白,使用重組蛋白免疫小鼠獲得其多克隆抗體,并采用半定量PCR及Western blotting方法檢測(cè)Bmintegrin β1的時(shí)空表達(dá)。文中得到家蠶整合素Bmintegrin β1的3種剪切形式,且這3種剪切體具有長(zhǎng)為2 502 bp的開(kāi)放閱讀框架,編碼833個(gè)氨基酸。根據(jù)預(yù)測(cè)該蛋白含有Integrin-B-tail、跨膜區(qū)等一系列整合素家族保守的結(jié)構(gòu)域。進(jìn)化樹(shù)結(jié)果表明該蛋白與同為鱗翅目成員的煙夜蛾和黑脈金斑蝶的整合素蛋白最為接近。此外我們通過(guò)原核表達(dá)系統(tǒng)及親和層析技術(shù)獲得了高純度的Bmintegrin β1蛋白,進(jìn)一步制得多克隆抗體。并通過(guò)免疫印跡反應(yīng)證明該抗血清能特異識(shí)別Bmintegrin β1重組蛋白。之后通過(guò)半定量PCR及免疫印跡檢測(cè),結(jié)果顯示該蛋白在家蠶的各組織以及血細(xì)胞各時(shí)期均有較高表達(dá)且在血液中表達(dá)量最高�？傊�,這項(xiàng)研究為家蠶整合素家族的研究提供了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Integrin as a transmembrane glycoprotein, is closely related with the organism's physiology and pathology and other processes. In order to explore the role played in the silkworm, through PCR and RACE technology cloned Bombyx mori family member Bmintegrin integrin beta 1, predict the site to predict the structure of domain by domain, and construct evolution the evolutionary relationships were analyzed by prokaryotic expression system and method for protein purification to obtain the recombinant protein using recombinant protein immunized mice polyclonal antibody, and using semi quantitative PCR and Western blotting method to detect the expression of temporal Bmintegrin beta 1. 3 splicing forms of silkworm Bmintegrin beta 1 integrin in this paper and, the 3 shear body with length of 2502 BP open reading frame encoding 833 amino acids. According to the prediction of the protein containing Integrin-B-tail, transmembrane region and a series of integration Domain family conservative. Phylogenetic tree analysis shows that the protein with Lepidoptera members of Helicoverpa assulta and the monarch of the integrin is closest. In addition we through the prokaryotic expression system and affinity chromatography to obtain high purity Bmintegrin beta 1 protein to prepare polyclonal antibody. And through the blot proved that the antiserum could specifically recognize the recombinant protein Bmintegrin beta 1. By semi quantitative PCR and Western blotting showed that the protein, in different tissues of silkworm and the period of blood cells have high expression in the blood and scale up the highest results. In conclusion, this study provides a basis for the study of silkworm integrin family.

【作者單位】： 西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.31672496) 重慶自然科學(xué)基金(No.cstc2016jcyj A0425) 重慶高校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)計(jì)劃(No.CXTDX201601010)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：Q78;Q966

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李會(huì)成,李玉新,金萍,張聰,烏垠,陸軍,楊紅,麻彤暉,黃百渠;載脂蛋白E3的克隆及原核表達(dá)[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2003年01期

2 孫軍;;淺談原核表達(dá)的技巧[J];大學(xué)時(shí)代;2006年07期

3 金元昌;李景鵬;李會(huì)東;周建紅;;重組促性腺激素釋放激素基因原核表達(dá)的影響因素[J];湘潭師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年02期

4 韓鈺;王艷林;;小鼠精胺氧化酶的原核表達(dá)與鑒定[J];生物技術(shù)通訊;2007年01期

5 朱向前;楊靜;丁曉然;王升啟;;重組人磷脂爬行酶1的原核表達(dá)及純化[J];生物技術(shù)通訊;2011年06期

6 哲名家;張淼濤;云濤;王玢tx;劉光清;;兔巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆與原核表達(dá)[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年04期

7 謝海燕,郭霄峰;豬α-干擾素的原核表達(dá)[J];華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年04期

8 孫東波;馮力;劉杰;時(shí)洪艷;佟有恩;劉勝旺;童光志;;豬傳染性胃腸炎病毒n基因的原核表達(dá)及重組蛋白的免疫活性分析[J];病毒學(xué)報(bào);2006年02期

9 孫軍;王俊杰;秦波;伏秀青;高倩倩;王興智;朱筱娟;;粘著斑激酶的原核表達(dá)、純化及抗體的制備[J];分子科學(xué)學(xué)報(bào);2007年02期

10 戴華;鄭佳玉;陳俊華;潘志明;焦新安;;雞α干擾素基因的原核表達(dá)及其活性測(cè)定[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2009年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 馬文濤;閆若潛;吳志明;劉光輝;盛敏;謝彩華;;豬白細(xì)胞介素-6的原核表達(dá)及其生物學(xué)活性研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)——第二屆中國(guó)獸醫(yī)臨床大會(huì)論文集(下冊(cè))[C];2010年

2 丁夢(mèng)蝶;魯?shù)?王紅寧;田浪;陽(yáng)泰;張毅;樊汶樵;郭自成;;禽傳染性支氣管炎病毒多基因串聯(lián)表位抗原的原核表達(dá)研究[A];四川省動(dòng)物學(xué)會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨第十屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

3 隋桂琴;左玲;王桂云;;人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的原核表達(dá)[A];中國(guó)眼底病論壇·全國(guó)眼底病專(zhuān)題學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

4 黃斯勇;梁英民;韓驊;李國(guó)輝;伍艷蘭;康志杰;何飛;張萍;徐恒;劉利;;人Detla-like4ext-93-217原核表達(dá)、純化及蛋白活性檢測(cè)[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

5 張紅;劉志國(guó);屈伸;;人源受體相關(guān)蛋白的原核表達(dá)優(yōu)化及功能檢測(cè)[A];湖北省暨武漢生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)和第十五次學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

6 袁志棟;王志亮;劉雨田;吳曉東;劉海生;;水貂朊蛋白前體基因的克隆與原核表達(dá)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第六次研討會(huì)論文集[C];2005年

7 王士友;張耀洲;;一個(gè)新的家蠶基因的克隆、原核表達(dá)及純化[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2006年

8 伍艷蘭;黃斯勇;牛曉麗;張麗;陳茹菲;何飛;張萍;梁英民;劉利;;人Delta-like4ext-93-217原核表達(dá)、純化及蛋白活性檢測(cè)[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

9 王運(yùn)華;張耀洲;;一個(gè)新的家蠶基因的克隆及其原核表達(dá)研究[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2006年

10 劉梅芬;趙雪麗;謝彩華;劉光輝;盛敏;閆若潛;吳志明;;豬白細(xì)胞介素-2的原核表達(dá)及生物學(xué)活性測(cè)定研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第三屆豬病防控學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 張曉鳴;人IL-16的原核表達(dá)與其功能的初步研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2000年

2 曹秀利;楊樹(shù)PtCDD基因的原核表達(dá)及酶活分析[D];南京林業(yè)大學(xué);2008年

3 黃新河;小鼠TAp63γ的原核表達(dá)、純化、結(jié)構(gòu)及功能初步研究[D];四川大學(xué);2007年

4 張大鵬;VP60蛋白的原核表達(dá)、抗體制備及VP60基因轉(zhuǎn)化的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

5 張少斌;豌豆肌動(dòng)蛋白異型體（PEAc1）的原核表達(dá)及其藻熒光探針的研制[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

6 尹國(guó)華;利用Red重組系統(tǒng)構(gòu)建dsRNA原核表達(dá)體系抗煙草花葉病毒的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 彭傳林;家蠅抗真菌肽MAF-1原核表達(dá)體系優(yōu)化與活性分析[D];貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院;2015年

2 孫明潭;豬繁殖與呼吸綜合征病毒河北地方株ORF7基因的原核表達(dá)及ELISA方法的建立[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 達(dá)小強(qiáng);牦牛轉(zhuǎn)鐵蛋白基因克隆與原核表達(dá)[D];西北民族大學(xué);2015年

4 姜旭;百合無(wú)癥病毒16kDα基因的克隆、原核表達(dá)及亞細(xì)胞定位[D];大連理工大學(xué);2015年

5 王浩;禽源SP-A蛋白的原核表達(dá)及其部分抗菌活性研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 李歡;香蕉凝集素BanLec1的原核表達(dá)及活性分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

7 喬淦;一種文蛤多肽基因的克隆、原核表達(dá)、純化及功能性研究[D];青島科技大學(xué);2016年

8 張思;仿刺參補(bǔ)體AjC3部分基因的原核表達(dá)及多克隆抗體的制備[D];大連海洋大學(xué);2016年

9 豐婧;家蠅CYP6G4基因的原核表達(dá)與功能鑒定[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2016年

10 周潔楠;HSV-1衣被蛋白UL7基因的克隆及其在病毒增殖中的表達(dá)分析[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

，

本文編號(hào)：1729160