紅色熒光蛋白基因DsRed2植物表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
本文選題:玉米 切入點(diǎn):DsRed基因 出處:《分子植物育種》2017年05期
【摘要】:本研究通過(guò)簡(jiǎn)單檢測(cè)DsRed2基因的表型就能快速篩出含有目的基因的成熟籽粒。DsRed2是一種在激發(fā)光下呈紅色的熒光蛋白,根據(jù)在GenBank中獲得的DsRed2及其特異性啟動(dòng)子Ltp2的基因序列,設(shè)計(jì)特異性引物,并構(gòu)建篩選標(biāo)記為Bar基因的植物表達(dá)載體pCAMBIA3300-Ltp2-DsRed2,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)入玉米品種鄭單958中。經(jīng)除草劑篩選獲得210株抗性植株,PCR檢測(cè)得到陽(yáng)性植株80株,對(duì)PCR檢測(cè)呈陽(yáng)性的植株進(jìn)行試紙條檢測(cè),結(jié)果表明紅色熒光蛋白基因DsRed2已成功整合到玉米基因組中。通過(guò)標(biāo)記基因的快速檢測(cè),從而減少后代篩選的工作量和降低制種成本,為轉(zhuǎn)基因玉米新品種的篩選提供直觀有效的篩選標(biāo)記。
[Abstract]:By simply detecting the phenotype of the DsRed2 gene, the mature kernels containing the target gene. DsRed2 is a red fluorescent protein. According to the gene sequence of DsRed2 and its specific promoter Ltp2 obtained in GenBank, DsRed2 is a red fluorescent protein.Specific primers were designed and the plant expression vector pCAMBIA3300-Ltp2-DsRed2 was constructed to screen the plant expression vector pCAMBIA3300-Ltp2-DsRed2, which was transferred into maize variety Zhengdan 958 by Agrobacterium tumefaciens.80 PCR positive plants were obtained by herbicide screening. The results showed that the red fluorescent protein gene DsRed2 had been successfully integrated into the maize genome.Through the rapid detection of marker genes, the workload of selection of progeny and the cost of seed production were reduced, and the screening markers were provided directly and effectively for the screening of new varieties of transgenic maize.
【作者單位】: 吉林吉農(nóng)高新技術(shù)發(fā)展股份有限公司;吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;
【基金】:吉林省科技廳產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新戰(zhàn)略聯(lián)盟項(xiàng)目(20140309005NY) 國(guó)家支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2014BAD01B01)共同資助
【分類號(hào)】:Q943.2
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,本文編號(hào):1719046
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