‘水晶’梨褐色果皮突變體木質(zhì)素合成相關(guān)基因的克隆與表達(dá)分析
本文選題:‘水晶’梨 切入點:褐色果皮突變體 出處:《河北科技師范學(xué)院》2016年碩士論文
【摘要】:本研究以‘水晶’梨及其褐色果皮突變體幼果期、果點變褐期、果皮變褐期、成熟期果皮為試驗材料,克隆木質(zhì)素合成關(guān)鍵基因及合成途徑上游轉(zhuǎn)錄因子MYB基因,并對克隆的基因序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析。同時,對木質(zhì)素合成關(guān)鍵基因及轉(zhuǎn)錄因子MYB基因的表達(dá)進(jìn)行分析。結(jié)果表明:1.以‘水晶’梨及其褐色果皮突變體的葉片DNA為模板,克隆得到了木質(zhì)素合成相關(guān)基因CAD1和POD4的全長基因序列、4CL1的部分基因序列,以及MYB86的全長基因序列!А婕捌浜稚ね蛔凅w中,四個基因的外顯子序列相同,翻譯得到的氨基酸序列一致,而內(nèi)含子存在單核苷酸差異。進(jìn)一步的生物信息學(xué)分析顯示,CAD1、POD4、4CL1、MYB86四個基因序列與梨屬中已報道的序列具有很高的同源性,序列同源性均在90%以上。蛋白空間結(jié)構(gòu)分析表明,CAD1、POD4、4CL1、MYB86蛋白二級結(jié)構(gòu)主要由α-螺旋和隨機卷曲組成,且均無跨膜結(jié)構(gòu)域,其中4CL1和POD4為疏水蛋白,CAD1和MYB86為親水蛋白。2.對‘水晶’梨及其褐色果皮突變體不同時期PAL2、4CL1、CAD1、POD4和MYB86基因的表達(dá)分析表明,這五個基因的表達(dá)均呈先升后降的趨勢,在果點變褐期表達(dá)量最高,并且在‘水晶’梨中,這五個基因在四個時期的表達(dá)量均低于褐色果皮突變體,表明PAL2、4CL1、CAD1、POD4與褐色果皮的形成有正相關(guān)性,MYB86與PAL2、4CL1、CAD1和POD4四個基因的表達(dá)呈正相關(guān)。3.本試驗獲得了‘水晶’梨及其褐色果皮突變體果皮中木質(zhì)素合成的關(guān)鍵基因的序列信息,豐富了基因庫信息,并通過熒光定量PCR分析了這些關(guān)鍵基因在‘水晶’梨褐色果皮突變體形成中的表達(dá)模式,對探究‘水晶’梨褐色果皮的形成機制具有重要意義。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:河北科技師范學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:Q943.2;S661.2
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,本文編號:1686320
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