本文選題：vasa　切入點(diǎn)：中華鱉　出處：《水生生物學(xué)報(bào)》2017年02期

【摘要】：研究利用中華鱉為研究模型進(jìn)行爬行類生殖細(xì)胞發(fā)育分化成熟等生物學(xué)研究,克隆了中華鱉vasa基因的c DNA序列,全長3865 bp,包括5′端非編碼區(qū)90 bp,3′端非編碼區(qū)1699 bp,開放閱讀框長2076 bp,共編碼691個(gè)氨基酸。中華鱉Vasa氨基酸序列包含DEAD-box家族蛋白8個(gè)保守保守功能域,在N末端有4個(gè)RGG重復(fù)序列和2個(gè)GG富集區(qū),與小鼠Vasa蛋白的同源性較高(72%)。熒光定量PCR的結(jié)果表明,中華鱉vasa m RNA主要精巢和卵巢中表達(dá),其他體組織中均難檢測到表達(dá)。卵巢冰凍切片原位雜交結(jié)果顯示:中華鱉vasa m RNA在生殖細(xì)胞中特異表達(dá);在卵子發(fā)生過程中的不同發(fā)育期卵母細(xì)胞中呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)的變化。即vasa m RNA在初級卵母細(xì)胞及生長期卵母細(xì)胞中表達(dá)最強(qiáng),且均勻分布在細(xì)胞質(zhì)中,隨著卵母細(xì)胞的逐漸增大,信號(hào)逐漸減弱,直至在成熟的卵母細(xì)胞中幾乎檢測不到表達(dá)信號(hào),說明vasa可能在中華鱉早期卵母細(xì)胞發(fā)育中起重要作用。同時(shí),vasa基因可作為中華鱉生殖細(xì)胞分子標(biāo)記物,根據(jù)其m RNA的表達(dá)水平來鑒別不同發(fā)育時(shí)期的卵母細(xì)胞。研究結(jié)果為進(jìn)一步開展中華鱉胚胎生殖細(xì)胞發(fā)育及配子生成,特別是研究中華鱉,乃至爬行類原始生殖細(xì)胞(Primordial Germ Cells,PGCs)的起源、遷移、分化等研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The c DNA sequence of vasa gene of Trionyx sinensis (Trionyx sinensis) was cloned by using the model of development, differentiation and maturation of reptile germ cells. The total length of 3865 BP, including the 5 '-terminal non-coding region of 90bp and the 3'-terminal region of 1699 BP, and the length of the open reading frame of 2076 BP, encode 691 amino acids. The Vasa amino acid sequence of Trionyx sinensis contains 8 conserved functional domains of the DEAD-box family protein. There were 4 RGG repeats and 2 GG rich regions at the N-terminal, which had high homology with mouse Vasa protein. The results of fluorescence quantitative PCR showed that vasa m RNA was mainly expressed in spermary and ovary of Trionyx sinensis. The results of in situ hybridization of frozen sections of ovary showed that vasa m RNA was expressed specifically in germ cells of Trionyx sinensis. The expression of vasa m RNA was the strongest in the primary oocytes and oocytes in the growing stage, and distributed uniformly in the cytoplasm, and increased with the increase of the oocytes. The signal was gradually weakened until almost no expression signal was detected in mature oocytes, indicating that vasa may play an important role in the early oocyte development of Trionyx sinensis, and Vasa gene could be used as a molecular marker of germ cells of Trionyx sinensis. According to the expression level of m RNA, the oocytes of different developmental stages were identified. The results showed that the embryonic germ cell development and gametophysiogenesis of Trionyx sinensis were further developed, especially in Trionyx sinensis. The origin, migration and differentiation of primordial Germ CellsCss of reptile primordial germ cells have laid a foundation for the study of the origin, migration and differentiation of primordial germ cells.
【作者單位】： 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部熱帶亞熱帶水產(chǎn)資源利用與養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院;
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目-國際科技合作領(lǐng)域(2016A050502029);廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014A020208037) 引進(jìn)國際先進(jìn)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)‘948’項(xiàng)目(2015-Z019)資助~~
【分類號(hào)】：S917.4

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