本文選題：弓形蟲　切入點(diǎn)：基因型　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：背景弓形蟲是一種人畜共患,傳播廣泛,寄生于溫血?jiǎng)游镉泻思?xì)胞內(nèi)的機(jī)會(huì)性致病原蟲。弓形蟲感染后可造成宿主的嚴(yán)重危害,引起全身播散感染甚至死亡。弓形蟲對(duì)宿主損害的靶器官主要為眼,腦、心、肝和淋巴結(jié)。已知世界各地流行的弓形蟲基因型為Type I、Type II、Type III以及Type12,但是有報(bào)道大多數(shù)從北美和歐洲的人和動(dòng)物體內(nèi)分離到的弓形蟲蟲株為Type II,其次為Type I和Ⅲ三型。目前對(duì)于上述I、II和III型蟲株的毒力及致病性研究較為深入,并證實(shí)Type I的毒力明顯強(qiáng)于Type II/Ⅲ,能致使急性感染小鼠短期內(nèi)死亡。然而對(duì)于中國(guó)流行的優(yōu)勢(shì)基因型Chinese1(代表蟲株Wh3、Wh6)以及Wh3和Wh6蟲株在與Type I和Type II/Ⅲ毒力及致病性方面的差異致病力及毒力尚待系統(tǒng)研究。故進(jìn)一步了解我國(guó)弓形蟲優(yōu)勢(shì)基因型株的致病特點(diǎn)對(duì)于本病的防治尤為重要。目的本課題將通過動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn),觀察中國(guó)優(yōu)勢(shì)基因型Chinese1(Wh3、Wh6)的致病力及毒力,描述其對(duì)宿主靶器官的病理學(xué)損害,并與Type I(RH株)和Type II(PRU株)比較,尋求不同地域不同基因型蟲株弓形蟲毒力及致病力差異。方法1.Wh3、Wh6,PRU,RH各株速殖子的復(fù)蘇、獲取與保種。2.建立弓形蟲感染小鼠模型,A組125只小鼠,分為正常組、RH感染組、Wh3感染組、Wh6感染組、PRU感染組,觀察A組感染小鼠發(fā)病癥狀、生存率,鑒定毒力。B組100只小鼠,分組方法同上,分時(shí)間段處死小鼠。A組與B組正常組小鼠腹腔注射0.2ml生理鹽水作為對(duì)照,保持與速殖子感染組所用懸液一致。3.從感染后2天至1個(gè)月分時(shí)間段(2d,3d,5d,10d和1M)處死小鼠,提取小鼠肝,肺,腦,淋巴結(jié),睪丸組織行HE染色,觀察組織病理學(xué)變化。4.應(yīng)用q RT-PCR檢測(cè)不同時(shí)間段留取各組織標(biāo)本內(nèi)的弓形蟲蟲荷。5.應(yīng)用q RT-PCR技術(shù)檢測(cè)各組脾細(xì)胞IL-12、INF-γ、IL-4和IL-10細(xì)胞因子水平的變化。結(jié)果1.從急性感染小鼠發(fā)病癥狀、死亡時(shí)間以及生存率觀察,其毒力依次為RH與Wh3相近Wh6PRU。2.HE染色觀察各組急性感染小鼠肝,肺,腦,睪丸,淋巴結(jié)的組織病理切片,顯示弓形蟲急性感染小鼠,可對(duì)小鼠多個(gè)器官造成損害,鏡下觀察組織病理變化可推測(cè)各株毒力及致病性強(qiáng)弱依次為RH與Wh3相近Wh6PRU。3.應(yīng)用q RT-PCR方法檢測(cè)肺、肝、腦、睪丸各臟器弓形蟲蟲荷數(shù)量依次為RH與Wh3相近Wh6PRU。通過四組蟲荷數(shù)據(jù)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)得出RH組與Wh3組、PRU組與Wh6組蟲荷無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;RH組與PRU組和Wh6組蟲荷均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Wh3組與PRU組和Wh6組蟲荷均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.根據(jù)現(xiàn)有的q RT-PCR方法測(cè)出的脾細(xì)胞細(xì)胞因子數(shù)據(jù),得出Wh6組與PRU組INF-γ和IL-4有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,PRU組高于Wh6組;Wh6組與PRU組IL-10無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1.通過觀察急性感染我國(guó)優(yōu)勢(shì)基因型Chinese1(Wh3、Wh6)株小鼠,發(fā)現(xiàn)2組小鼠生存率均較低,Wh3組10天內(nèi)全部死亡,Wh6組15天內(nèi)全部死亡,組織切片可見2組小鼠肝,腦,肺,睪丸,淋巴結(jié)均有不同程度病理學(xué)改變,其中Wh3較Wh6病理變化更明顯。2.根據(jù)急性感染小鼠發(fā)病癥狀、生存率及組織病理切片觀察毒力及致病性強(qiáng)弱依次為RH與Wh3相近Wh6PRU。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R382.5

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