實(shí)時熒光LAMP法檢測轉(zhuǎn)基因豬的標(biāo)記基因hCD3
發(fā)布時間:2018-03-22 14:28
本文選題:環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP) 切入點(diǎn):特異性檢測 出處:《畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年03期 論文類型:期刊論文
【摘要】:利用ESE-Quant tube scanner監(jiān)測平臺,建立了一種基于實(shí)時熒光LAMP技術(shù)的hCD39基因快速檢測方法。針對hCD39基因設(shè)計(jì)6條特異性引物,在63℃條件下,進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)45 min。在擴(kuò)增前加入SYBR GreenⅠ染料作為反應(yīng)的指示劑,以SYBR GreenⅠ染料的熒光強(qiáng)度作為結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)。該方法靈敏度高,最小可檢測到3fg·μL-1;特異性好,與轉(zhuǎn)基因豬中的標(biāo)記基因hCD46、LEA29Y均無交叉反應(yīng);并且可對口腔拭子標(biāo)本進(jìn)行檢測。因此,研究建立的實(shí)時熒光LAMP法,操作簡單,反應(yīng)快速,靈敏度高,特異性好,并且可以對豬活體進(jìn)行無損傷采樣檢測,適合在現(xiàn)場快速簡便的操作。
[Abstract]:Using ESE-Quant tube scanner monitoring platform, a rapid detection method of hCD39 gene based on real-time fluorescent LAMP technique was established. Six specific primers were designed for hCD39 gene at 63 鈩,
本文編號:1649058
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