重組pEGFP-N1-IGF-Ⅰ基因表達(dá)質(zhì)粒促進(jìn)SD大鼠牙囊細(xì)胞增殖及早期成骨分化效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2018-03-21 04:20
本文選題:胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ 切入點(diǎn):牙囊細(xì)胞 出處:《重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:通過胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)與增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合表達(dá),構(gòu)建重組質(zhì)粒pEGFP-N1-IGF-Ⅰ。體外實(shí)驗(yàn)分析脂質(zhì)體介導(dǎo)pEGFP-N1-IGF-Ⅰ轉(zhuǎn)染SD大鼠牙囊細(xì)胞(rat dental follicle cells,rDFCs)對(duì)其增殖及早期成骨分化效應(yīng)的影響。方法:體外分離培養(yǎng)rDFCs并分為空白組、pEGFPN1-IGF-Ⅰ組、pEGFP-N1+脂質(zhì)體組和pEGFP-N1-IGF-Ⅰ+脂質(zhì)體組。采用熒光顯微鏡觀察綠色熒光表達(dá)情況,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性檢測(cè)法檢測(cè)ALP活性,PCR檢測(cè)Ⅰ型膠原(collagen type 1,Col1)表達(dá)情況。結(jié)果:熒光顯微鏡觀察結(jié)果表明pEGFP-N1-IGF-Ⅰ成功轉(zhuǎn)染入rDFCs。轉(zhuǎn)染后48 h,脂質(zhì)體處理組(pEGFP-N1+脂質(zhì)體組和pEGFP-N1-IGF-Ⅰ+脂質(zhì)體組)轉(zhuǎn)染效率較非脂質(zhì)體處理組(空白組和pEGFP-N1-IGF-Ⅰ組)高。MTT結(jié)果表明,pEGFP-N1-IGF-Ⅰ能增強(qiáng)rDFCs細(xì)胞活性,而脂質(zhì)體毒性對(duì)細(xì)胞活性具有抑制作用。ALP活性檢測(cè)結(jié)果顯示pEGFP-N1-IGF-Ⅰ能增強(qiáng)rDFCs的ALP活性。PCR結(jié)果證明pEGFP-N1-IGF-Ⅰ能增加Col1α1及Col1α2的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)論:pEGFP-N1-IGF-I能促進(jìn)rDFCs增殖和早期成骨分化效應(yīng),為IGF-Ⅰ基因在牙周組織修復(fù)再生中的應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of insulin-like growth factor- 鈪,
本文編號(hào):1642230
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