雷公藤單萜合酶基因TwMS的克隆及蛋白表達(dá)分析
發(fā)布時(shí)間:2018-03-20 02:03
本文選題:雷公藤 切入點(diǎn):單萜合酶 出處:《中國中藥雜志》2017年07期 論文類型:期刊論文
【摘要】:該研究克隆得到1條雷公藤單萜合酶基因TwMS。其完整開放閱讀框?yàn)?797bp,編碼579個(gè)氨基酸,相對分子質(zhì)量為69.75kDa、理論等電點(diǎn)為5.37。生物信息學(xué)分析表明,TwMS具有單萜合酶的特征結(jié)構(gòu)域,屬于萜類合酶TPSb亞家族。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測顯示,經(jīng)茉莉酸甲酯(MeJA)誘導(dǎo)后,TwMS的相對表達(dá)量顯著上調(diào),并在24 h達(dá)到最高。此外,該研究在大腸桿菌BL21(DE3)中成功表達(dá)TwMS蛋白,為進(jìn)一步研究該基因的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In this study, a monoterpene synthase gene TwMSfrom Tripterygium wilfordii was cloned. Its complete open reading frame was 1797bp, encoding 579 amino acids, the relative molecular weight was 69.75kDa, and the theoretical isoelectric point was 5.37.The bioinformatics analysis showed that TwMS had the characteristic domain of monoterpene synthase. It belongs to the TPSb subfamily of terpene synthase. Real-time quantitative PCR analysis showed that the relative expression of TwMS was significantly up-regulated after induction by methyl jasmonate, and reached the highest level in 24 h. In addition, the TwMS protein was successfully expressed in E. coli BL21DE3. It lays a foundation for further study of the function of the gene.
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院中醫(yī)絡(luò)病研究北京重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國中醫(yī)科學(xué)院中藥資源中心道地藥材國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地;
【基金】:國家自然科學(xué)基金優(yōu)秀青年科學(xué)基金項(xiàng)目(81422053);國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81373906)
【分類號】:S567.19
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1 馬泉芳;單萜合酶AtTPS03基因在湘油15中的過表達(dá)研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年
,本文編號:1636997
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