本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子在植物抗病基因工程中的研究進(jìn)展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《第十二屆中國科協(xié)年會——非糧生物質(zhì)能源與高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化研討會論文集》2010年

黃連木LEC1轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及表達(dá)分析

林善枝  張志翔  侯路  王濤  侯琦  孫潤澤  

【摘要】：黃連木(Pistacia chinensis Bunge)是一種重要的木本油料樹種,其種子含油量高、出油率高,是制備生物柴油的優(yōu)質(zhì)原料。本研究以黃連木種子為試材,利用簡并RT-PCR和RACE方法首次成功克隆得到黃連木LEC1轉(zhuǎn)錄因子基因的cDNA序列(命名為PcLEC1,GenBank上登記號為HM627254),該序列長988bp,包括741bp完整的開放閱讀框,編碼247個(gè)氨基酸;該基因的核酸序列及其編碼的氨基酸序列與已報(bào)道其他物種的LEC1基因具有較高相似性;同時(shí),對PcLEC1基因編碼蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析,結(jié)果表明,PcLEC1蛋白為親水性蛋白,pI為6.235,二級結(jié)構(gòu)主要為α螺旋和無規(guī)則卷曲,三級結(jié)構(gòu)含有histone fold結(jié)構(gòu)。無信號肽和跨膜區(qū)域,定位于細(xì)胞核,含有CBFD NFYB HMF功能結(jié)構(gòu)域和NFYB_HAP3保守位點(diǎn),存在多個(gè)潛在的磷酸化位點(diǎn)和其它修飾位點(diǎn),并具有轉(zhuǎn)錄因子活性。另外,通過對黃連木PcLEC1及其他植物來源的LEC1蛋白序列的比對后發(fā)現(xiàn),植物L(fēng)EC1蛋白的B區(qū)序列高度保守,其它區(qū)域氨基酸序列差異非常大;進(jìn)化樹分析表明,與黃連木PcLEC1親緣關(guān)系最近的是擬南芥和油菜。在此基礎(chǔ)上,開展黃連木PcLEC1基因的原核及真核表達(dá)載體構(gòu)建及表達(dá)研究,結(jié)果表明,在37℃條件下,1mM IPTG誘導(dǎo)4h,融合蛋白表達(dá)量較大;目前已成功獲得轉(zhuǎn)PcLEC1基因的煙草植株,轉(zhuǎn)基因煙草種籽的含油量及油質(zhì)質(zhì)量分析正進(jìn)行中。上述研究結(jié)果可為黃連木LEC1轉(zhuǎn)錄因子基因PcLEC1的應(yīng)用奠定重要基礎(chǔ),具有廣泛的應(yīng)用前景。

【作者單位】：
【基金】：“十一五”國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目“生物質(zhì)資源高效培育技術(shù)研究”(No.2006ABD07A04)資助
【分類號】：S565.9
【正文快照】：

LEcl(L eafy cotyledonl)是胚胎發(fā)育過程中關(guān)鍵調(diào)控因子。目前已有研究表明，控制胚胎形成以及種子發(fā)育過程中的多個(gè)方面[’一，而且LEcl可通過影響脂肪酸合成基因表達(dá)，進(jìn)而參與脂肪酸生物合成的調(diào)控[1“】。盡管至今己從擬南芥、胡蘿卜、玉米、向日葵等植物相繼克隆得到LEc

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本文編號：161758