本文選題：Ets差異基因　切入點：血管平滑肌細胞　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5(ETV5)在血管平滑肌細胞(VSMC)表型轉(zhuǎn)化中的作用。方法分別采用ETV5過表達腺病毒載體(Ad-ETV5組)和綠色熒光蛋白(GFP)過表達腺病毒載體(Ad-GFP組)轉(zhuǎn)染VSMC。人ETV5特異性小干擾RNA[血小板源性生長因子(PDGF)-BB+siRNAETV5組]及其隨機陰性序列(PDGF-BB+siRNAscramble組)分別轉(zhuǎn)染VSMC后采用PDGF-BB誘導(dǎo)VSMC表型轉(zhuǎn)化。分別采用實時定量PCR(qPCR)和蛋白質(zhì)印跡法檢測各組細胞中VSMC表型標記物α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和肌球蛋白重鏈11(MYH11)mRNA和蛋白的表達水平。分別采用平板劃痕實驗和CCK-8試劑盒檢測各組VSMC的遷移和增殖活性。結(jié)果與Ad-GFP組相比,Ad-ETV5組VSMC中α-SMA和MYH11mRNA和蛋白的表達均降低(P0.05),遷移和增殖活性均升高(P0.05)。與PDGF-BB+siRNAscramble組相比,PDGF-BB+siRNAETV5組VSMC中α-SMA和MYH11mRNA和蛋白的表達均升高(P0.05),而遷移和增殖活性降低(P0.05)。結(jié)論 ETV5參與了VSMC的表型轉(zhuǎn)化。
[Abstract]:Objective to investigate the role of transcriptional factor Ets differential gene 5 (ETV5) in phenotypic transformation of vascular smooth muscle cells (VSMCs). Methods ETV5 overexpression adenovirus vector (Ad-ETV5 group) and green fluorescent protein (GFP) overexpression adenovirus vector (Ad-GFP group) were used respectively. VSMC.Human ETV5 specific small interfering RNA [platelet-derived growth factor-PDGF-BB siRNAETV5 group] and its random negative sequence PDGF-BB siRNAscramble were transfected into VSMC and PDGF-BB induced VSMC phenotypic transformation. Real-time quantitative PCRqPCR and Western blotting were used to detect VSMC phenotype. The expression levels of 偽 -SMAand myosin heavy chain 11MYH11C mRNA and protein in VSMC phenotypic markers were measured. The migration and proliferation activity of VSMC in each group were detected by plate scratch test and CCK-8 kit, respectively. The expression of 偽 -SMA, MYH11mRNA and protein in VSMC of Ad-GFP group was lower than that of Ad-ETV5 group, and the activity of migration and proliferation was higher than that of PDGF-BB siRNAscramble group. Compared with PDGF-BB siRNAscramble group, the expression of 偽 -SMA, MYH11mRNA and protein in VSMC of PDGF-BB siRNAETV5 group was higher than that of PDGF-BB siRNAscramble group, while the expression of 偽 -SMA, MYH11mRNA and protein in VSMC of PDGF-BB siRNAscramble group was lower than that of PDGF-BB siRNAscramble group. ETV5 is involved in the phenotypic transformation of VSMC.
【作者單位】： 解放軍117醫(yī)院心血管治療中心;
【分類號】：R54

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本文編號：1605289