本文選題：黑曲霉　切入點(diǎn)：α-葡萄糖苷酶　出處：《現(xiàn)代食品科技》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：已公布的黑曲霉CBS513.88基因組中注釋了7個(gè)α-葡萄糖苷酶基因信息,但其中主要高活性基因一直未報(bào)道。本文通過同源重組構(gòu)建了黑曲霉SH-2菌株7個(gè)α-葡萄糖苷酶基因的系列多重敲除株。α-葡萄糖苷酶活性測定結(jié)果顯示僅agd B敲除株的酶活相較于野生株SH-2降低36%,而其余多重敲除株菌株酶活影響較小。以敲除糖化酶、淀粉酶背景的黑曲霉SH-2-3菌株為宿主,分別敲除和過量表達(dá)基因agd B及與已報(bào)道的黑曲霉α-葡萄糖苷酶基因序列相似度最高的基因agd A,結(jié)果顯示agd B敲除株生長速度在不含葡萄糖的培養(yǎng)條件下最慢,并隨著葡萄糖添加量增加;agd B過量表達(dá)株酶活提高到野生型的10倍。本研究結(jié)果說明目前黑曲霉SH-2基因組中所注釋的7個(gè)α-葡萄糖苷酶基因中僅agd B為主要高活性α-葡萄糖苷酶基因(占總體酶活36%),黑曲霉SH-2中α-葡萄糖苷酶基因仍需進(jìn)一步探索。
[Abstract]:Seven 偽 -glucosidase genes were annotated in the CBS513.88 genome of Aspergillus Niger. But the major high activity genes have not been reported. In this paper, we constructed 7 multiple knockout strains of 偽 -glucosidase gene from Aspergillus Niger SH-2 strain by homologous recombination. The results of 偽 -glucosidase activity test showed that only agd B knockout was obtained. The enzyme activity of the strain was 36% lower than that of the wild strain, while the enzyme activity of the other multiple knockout strains was less than that of the wild strain. Amylase background of Aspergillus Niger SH-2-3 strain as host, The knockout and overexpression gene agd B and the gene agd A, which has the highest similarity to the reported 偽 -glucosidase gene of Aspergillus Niger, respectively. The results showed that the growth rate of agd B knockout plant was the slowest in the culture condition without glucose. With the increase of glucose supplementation, the enzyme activity of the overexpression strain of agd B was increased by 10 times to that of the wild type. The results show that only agd B is the main high activity of 7 偽 -glucosidase genes annotated in the genome of Aspergillus Niger at present. The 偽-glucosidase gene (which accounts for 36% of the total enzyme activity) needs to be further explored in Aspergillus Niger (SH-2).
【作者單位】： 華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院;
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2016A050503016、S2012030006235、2016A010105004) 華南理工大學(xué)中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)資助項(xiàng)目(2015ZP032、2015ZZ040)
【分類號(hào)】：Q936

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本文編號(hào)：1589168