反義RNA介導GmFAD2-1B基因沉默增強大豆種子中油酸的高效累積
本文選題:大豆 切入點:油酸 出處:《作物學報》2017年11期 論文類型:期刊論文
【摘要】:油酸含量是評價大豆油食用品質(zhì)和穩(wěn)定性的重要指標。本研究采用農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化法,將反義GmFAD2-1B基因?qū)朐耘啻蠖蛊贩N,獲得油酸含量顯著提高的轉(zhuǎn)基因大豆新品系。Southern雜交檢測表明,外源GmFAD2-1B基因片段已導入大豆基因組,其插入拷貝數(shù)為1~5個。q RT-PCR檢測表明,外源GmFAD2-1B主要在大豆種子中表達,并導致種子中內(nèi)源GmFAD2-1 m RNA表達水平顯著降低,而根、莖、葉、花組織中內(nèi)源GmFAD2-1 m RNA表達水平無顯著變化。脂肪酸組分分析表明,12份轉(zhuǎn)基因大豆種子油酸含量為27.38%~80.42%,其中,L40和L72油酸含量分別為68.91%~80.42%和65.98%~80.22%,較對照品種Williams 82(17.8%~22.0%)提高2.65倍以上,亞油酸降低至4.84%~14.55%,飽和脂肪酸降低至10.34%~11.16%,但總脂肪和總蛋白含量與對照品種相比沒有顯著變化。農(nóng)藝性狀分析表明,轉(zhuǎn)基因大豆在熟期、株高、葉形、花色、結莢高度、百粒重等方面與對照品種也沒有顯著差異。
[Abstract]:The content of oleic acid is an important index to evaluate the edible quality and stability of soybean oil. In this study, antisense GmFAD2-1B gene was introduced into soybean varieties by Agrobacterium tumefaciens mediated transformation. Southern blot analysis of transgenic soybean lines with significant increase in oleic acid content showed that exogenous GmFAD2-1B gene fragment had been introduced into soybean genome, and the inserted copy number was 1 ~ 5. Q RT-PCR analysis showed that exogenous GmFAD2-1B was mainly expressed in soybean seeds. The expression level of endogenous GmFAD2-1 m RNA in seeds was significantly decreased, while the expression of endogenous GmFAD2-1 m RNA in root, stem and leaf was significantly decreased. There was no significant change in the expression level of endogenous GmFAD2-1 m RNA in floral tissues, and fatty acid composition analysis showed that the oleic acid content of 12 transgenic soybean seeds was 27.38 and 80.42, respectively. The oleic acid contents of L40 and L72 were 68.911and 65.980.22%, respectively, which were more than 2.65 times higher than those of the control variety Williams 8217.88.80.22. Linoleic acid decreased to 4.84 ~ 14.55 and saturated fatty acid decreased to 10.34 and 11.16, but the contents of total fat and total protein were not significantly different from those of the control. Agronomic analysis showed that transgenic soybean had high plant height, leaf shape, flower color and pod height at maturity. There was also no significant difference between 100 seed weight and control variety.
【作者單位】: 吉林省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)生物技術研究所/吉林省農(nóng)業(yè)生物技術重點實驗室;
【基金】:國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(2016ZX08004-003) 國家自然科學基金項目(31671764)資助~~
【分類號】:S565.1
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