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紫花苜蓿葉酸合成關(guān)鍵酶GCHI和ADCS編碼基因的克隆及分析

發(fā)布時(shí)間:2018-03-04 18:01

  本文選題:紫花苜蓿 切入點(diǎn):葉酸 出處:《植物生理學(xué)報(bào)》2017年07期  論文類型:期刊論文


【摘要】:GTP環(huán)化水解酶I (GCHI)與氨基脫氧分支酸合酶(ADCS)是植物葉酸合成途徑的限速酶,對(duì)葉酸的合成起著至關(guān)重要的作用。本研究利用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(RACE)結(jié)合逆轉(zhuǎn)錄PCR方法,克隆獲得了紫花苜蓿(Medicago sativa)的GCHI和ADCS編碼基因,分別命名為MsGCHI與MsADCS。序列分析結(jié)果表明,MsGCHI基因全長(zhǎng)1 752 bp,包含1 371 bp的開放閱讀框(ORF),編碼456個(gè)氨基酸;MsADCS基因全長(zhǎng)3 324 bp,ORF為2 613 bp,編碼870個(gè)氨基酸。經(jīng)同源比對(duì)與進(jìn)化樹分析,MsGCHI和Ms ADCS基因編碼的氨基酸與蒺藜苜蓿(M.truncatula)的MtGCHI和MtADCS氨基酸序列具有最高的同源性,分別達(dá)到98%和96%,與其他植物的氨基酸序列相似度也均在58%以上。實(shí)時(shí)定量熒光PCR分析結(jié)果表明,MsGCHI與MsADCS基因在紫花苜蓿的根、莖、葉中均有表達(dá),但在葉中的表達(dá)量都為最高。
[Abstract]:GTP cyclohydrolase I (I) and aminodeoxybranched acid synthase (ADCS) are rate-limiting enzymes for folic acid synthesis in plants, which play an important role in the synthesis of folic acid. In this study, rapid amplification of cDNA terminal was combined with reverse transcriptase (PCR). The GCHI and ADCS coding genes of Medicago sativa were cloned. They were named MsGCHI and MsADCS.The sequence analysis showed that the MsGCHI gene was 1 752 BP in length, containing 1 371 BP open reading frame (ORF), encoding 456 amino acids. The total length of 3 324 BP MsGCHI gene was 2 613 BP, encoding 870 amino acids. The amino acids encoded by MsGCHI and Ms ADCS genes were most homologous to the MtGCHI and MtADCS amino acid sequences of M. truncatula. The results of real-time quantitative PCR analysis showed that MsGCHI and MsADCS genes were expressed in the roots, stems and leaves of alfalfa, but they were the highest in leaves.
【作者單位】: 蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31670405和31372360) 蘭州大學(xué)中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(lzujbky-2016-4)~~
【分類號(hào)】:Q943.2;S541.9

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1566703

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