本文選題：轉(zhuǎn)基因小鼠　切入點：傳染病　出處：《中國比較醫(yī)學(xué)雜志》2017年09期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的制備小鼠MHV、LCM、ECT和HANT液相芯片,建立轉(zhuǎn)基因小鼠傳染病抗體的xMAP多重檢測方法。方法將熒光微球分別與小鼠MHV、LCM、ECT和HANT蛋白進(jìn)行偶聯(lián),并且對最佳蛋白偶聯(lián)量、檢測抗體最佳工作濃度和Streptavidin-PE最佳工作濃度進(jìn)行優(yōu)化,制備小鼠MHV、LCM、ECT和HANT液相芯片,對56個轉(zhuǎn)基因小鼠血清樣品、陰性血清、陽性血清和質(zhì)控血清進(jìn)行xMAP多重檢測。并應(yīng)用傳統(tǒng)的ELISA方法對xMAP檢測結(jié)果進(jìn)行驗證。結(jié)果 1)小鼠MHV、LCM、ECT和HANT蛋白的最佳偶聯(lián)量分別為20μg、20μg、40μg和20μg,檢測抗體最佳濃度分別為2μg/mL、2μg/mL、2μg/mL和4μg/mL;Streptavidin-PE抗體最佳濃度均為2μg/mL;(2)xMAP檢測結(jié)果顯示,14號、23號、55號和56號轉(zhuǎn)基因小鼠血清MHV MFI值和index值均高于質(zhì)控血清,其余小鼠血清的MFI值和index值均低于質(zhì)控血清,表明14號、23號、55號和56號轉(zhuǎn)基因小鼠MHV抗體陽性,其余小鼠MHV、LCM、ECT和HANT抗體陰性;(3)ELISA檢測結(jié)果顯示,14號、23號、55號和56號轉(zhuǎn)基因小鼠MHV A450值和index值均高于質(zhì)控血清,其余小鼠血清的A450值和index值均低于質(zhì)控血清,表明14號、23號、55號和56號轉(zhuǎn)基因小鼠MHV抗體陽性,其余小鼠MHV、LCM、ECT和HANT抗體陰性,該ELISA檢測結(jié)果與xMAP檢測結(jié)果相一致。結(jié)論建立的xMAP多重檢測技術(shù)可應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因小鼠的傳染病檢測。
[Abstract]:Objective to prepare mouse MHVG LCMT and HANT microarray and to establish a xMAP multiplex assay for the detection of infectious disease antibodies in transgenic mice. Methods the fluorescent microspheres were coupled with mouse MHVLCMECT and HANT proteins respectively, and the optimal protein coupling amount was obtained. The best working concentration of antibody and the best working concentration of Streptavidin-PE were optimized to prepare mouse MHVN LCMECT and HANT liquid chip. 56 transgenic mice serum samples were obtained and negative serum samples were obtained. The results were verified by traditional ELISA method. Results 1) the optimal coupling amounts of MHVG LCMECT and HANT protein in mice were 20 渭 g, 20 渭 g and 20 渭 g respectively, and the optimal concentration of antibody was 20 渭 g. The best concentration of Streptavidin-PE antibody for 2 渭 g / mL and 4 渭 g / mL Streptavidin-PE antibody was 2 渭 g / mL / mL and 4 渭 g / mL respectively. The results showed that the serum MHV MFI and index values of transgenic mice of 14 渭 g / mLL, 55 渭 g / mL and 56 渭 g / mL were higher than those of QCS. The MFI and index values of the other mice serum were lower than those of the quality control serum, indicating that the MHV antibody was positive in the transgenic mice of 14, 23, 55 and 56. The results of Elisa showed that the MHV A450 and index values of the 14, 23, 55 and 56 transgenic mice were higher than those of the quality control serum, while the A450 and index values of the other mice were lower than those of the quality control serum. The results showed that the MHV antibodies were positive in transgenic mice of 14, 23, 55 and 56, while the other mice were negative for MHVG LCMECT and HANT antibodies. Conclusion the xMAP multiplex detection technique can be used in the detection of infectious diseases in transgenic mice.
【作者單位】： 浙江中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗研究中心;
【基金】：浙江省科技計劃項目(編號:2015C37111) 浙江中醫(yī)藥大學(xué)比較醫(yī)學(xué)創(chuàng)新團(tuán)隊(編號:XTD201301)
【分類號】：Q95-33

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本文編號：1556321