柞蠶蛹解除滯育過程中海藻糖合成酶基因的表達變化
本文關鍵詞: 柞蠶 滯育 海藻糖合成酶 基因表達 滯育解除 出處:《昆蟲學報》2016年09期 論文類型:期刊論文
【摘要】:【目的】克隆柞蠶Antheraea pernyi海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)基因,并對其進行組織表達分析,探討該基因在柞蠶滯育蛹解除滯育過程中的表達規(guī)律,為闡明柞蠶滯育期間碳水化合物代謝規(guī)律與蛹滯育解除的關系提供數(shù)據(jù)支持!痉椒ā坷肞CR及3'RACE技術從柞蠶幼蟲脂肪體組織中克隆得到TPS基因,并進行生物信息學分析;RT-PCR檢測該基因在柞蠶幼蟲各組織中的表達分布,進一步采用Real-time PCR分析柞蠶滯育蛹解除滯育過程中該基因在脂肪體組織和血淋巴中的表達量變化!窘Y(jié)果】克隆獲得柞蠶海藻糖合成酶基因并命名為ApTPS。其開放閱讀框長2 487 bp,編碼828個氨基酸,蛋白預測分子量為93.19 k D,等電點(p I)4.61;無信號肽,無跨膜區(qū)。蛋白質(zhì)亞細胞定位預測該蛋白定位于細胞質(zhì)中;蛋白質(zhì)結(jié)構域分析表明,ApTPS有兩個保守功能區(qū):TPS(第22-497位氨基酸)和TPP(第532-772位氨基酸)。組織特異性分析表明,ApTPS基因在柞蠶幼蟲脂肪體中表達量最高;柞蠶解除滯育過程中,ApTPS在脂肪體和血淋巴中的表達量均有所升高,且顯著高于對照組(P0.05),但血淋巴中表達量的升高滯后于脂肪體!窘Y(jié)論】結(jié)果提示ApTPS參與了柞蠶蛹滯育中碳水化合物代謝調(diào)控并在其中發(fā)揮重要作用,與柞蠶蛹滯育解除關系密切。
[Abstract]:[Objective] cloning of trehalose synthase (trehalose-6-phosphate pernyi Antheraea from synthase, TPS) gene and its tissue expression analysis, explore the gene expression of diapause termination in Antheraea pernyi diapause pupae, to provide data support for the relationship during the clarify of Antheraea pernyi diapause carbohydrates metabolism and pupal diapause termination. [method] cloned from Tussah larvae in the fat body tissue TPS gene was obtained by using PCR and 3'RACE technology, and bioinformatics analysis; distributed RT-PCR detection expression of the gene in different tissues in Tussah larvae, further using Real-time PCR analysis of Antheraea pernyi diapause pupae diapause of the gene in fat body and hemolymph of expression change. [results] the cloned silkworm trehalose synthase gene named ApTPS. and the open reading frame of 2487 BP in length, encoding 828 amino acids, egg White predicted molecular weight of 93.19 K D, isoelectric point (P I) 4.61; no signal peptide and transmembrane regions. The protein subcellular localization prediction the protein located in the cytoplasm; protein domain analysis showed that ApTPS has two conserved domains: TPS (22-497 amino acids) and TPP (No. 532-772 amino acids). Tissue specificity analysis showed that ApTPS gene in silkworm larvae in the fat body highest expression; Antheraea pernyi diapause termination process, the amount of increased expression of ApTPS in the fat body and haemolymph, and significantly higher than that of the control group (P0.05), but the expression level in the hemolymph behind the fat body. [Conclusion] the results suggest that ApTPS is involved in carbohydrate metabolism and regulation of tussah pupa diapause played an important role in it, and the pupa diapause termination is closely related.
【作者單位】: 沈陽農(nóng)業(yè)大學生物科學技術學院 遼寧省昆蟲資源工程技術研究中心;遼寧省蠶業(yè)科學研究所;
【基金】:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項(CARS-22) 遼寧省農(nóng)業(yè)領域青年科技創(chuàng)新人才培養(yǎng)計劃項目(2014010) 遼寧省教育廳一般項目(L2014255,L2015488)
【分類號】:S885.1
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,本文編號:1543442
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