本文關(guān)鍵詞： 腺苷受體Ab 少突膠質(zhì)前體細胞 慢病毒 大鼠　出處：《神經(jīng)解剖學(xué)雜志》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:旨在構(gòu)建穩(wěn)定高表達腺苷受體A2b(adenosine recepbor A2b,A2b AR)的SD大鼠少突膠質(zhì)前體細胞體系(oligodendrocyte precursor cells,OPC),用于進一步探討OPC上A2b AR的相關(guān)功能。方法:取對數(shù)生長期的大鼠OPC,用攜帶A2b AR基因的慢病毒進行感染,嘌呤霉素進行篩選純化,依照慢病毒載體中的熒光標簽蛋白,通過熒光顯微鏡和Western Blot檢測OPC上A2b AR的表達。結(jié)果:慢病毒感染后,具有綠色熒光的OPC細胞比例不足5%,在給予嘌呤霉素連續(xù)處理6 d后,具有熒光標記的OPC比例趨于穩(wěn)定,去除嘌呤霉素的干預(yù)后,細胞增殖明顯,經(jīng)傳代培養(yǎng),具有熒光標記的OPC比例高于80%,Western Blot結(jié)果顯示A2b AR的表達明顯上調(diào)。獲得較高純度的攜帶A2b AR高表達基因的OPC,可以凍存、復(fù)蘇以及傳代。結(jié)論:采用攜帶A2b AR基因的慢病毒載體,可以成功感染SD大鼠OPC,構(gòu)建高表達A2b AR的OPC體系,為A2b AR在髓鞘發(fā)育與修復(fù)等方面的研究奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: to construct a stable oligodendrocyte precursor cells recepbor A2b AR-containing oligodendrocyte system of SD rats with high expression of adenosine recepbor A2bA2b. Methods: to further study the function of A2b AR on OPC. Methods: OPC rats in logarithmic growth phase were used to carry the oligodendrocyte precursor. A2b AR gene lentivirus infection, Purine mycin was screened and purified, and the expression of A2bAR on OPC was detected by fluorescence microscope and Western Blot according to the fluorescent label protein in lentivirus vector. Results: after lentivirus infection, the expression of A2bAR in lentivirus was detected by fluorescence microscope and Western Blot. The proportion of OPC cells with green fluorescence was less than 5%. After 6 days of continuous treatment with purine mycin, the proportion of OPC with fluorescence labeling tended to be stable. After removing the intervention of purine mycin, the cell proliferation was obvious and the cells were cultured by passage. The proportion of OPC with fluorescence labeling was higher than that of 80%. The results showed that the expression of A2bAR was up-regulated. The high purity of OPC carrying A2bAR gene could be frozen, resuscitated and subcultured. Conclusion: the lentivirus vector carrying A2bAR gene can be used. OPC could infect SD rats successfully and construct OPC system with high expression of A2bAR, which laid a foundation for the study of myelin development and repair of A2bAR.
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖與組織胚胎學(xué)系;寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院病理科;寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏顱腦疾病重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31360240) 寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)西部一流學(xué)科建設(shè)項目資助
【分類號】：R741

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